慢性牙周炎牙龈组织中Caspase-3、8的表达及其与细胞凋亡的相关性研究

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目的:研究慢性牙周炎(chronic periodentitis, CP)牙龈组织中细胞凋亡的情况,分析Caspase-3和Caspase-8在慢性牙周炎牙龈组织中的表达和意义,探讨二者的表达与慢性牙周炎牙龈组织细胞凋亡之间的关系,为进一步揭示慢性牙周炎发病及相关组织损伤中的可能机制建立新的诊断和治疗策略,并提供一定的理论基础和实验依据。方法:采用HE染色法普通光学显微镜观察23例慢性牙周炎和23例健康牙龈组织石蜡切片中细胞凋亡的发生和形态学变化,并结合透射电子显微镜观察凋亡细胞的超微结构,应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL法)检测慢性牙周炎和正常牙龈组织中细胞凋亡的情况和凋亡指数(apototic index, AI),同时运用免疫组化SP法检测Caspase-3和Caspase-8的表达、分布情况。实验结果采用SPSS16.0统计软件进行统计学分析,分析各组之间凋亡细胞指数及Caspase-3、Caspase-8的平均光密度和平均灰度值,并对Caspase-3和Caspase-8表达与慢性牙周炎牙龈组织细胞凋亡及两者之间的关系进行相关性分析。结果:1、较正常对照组,慢性牙周炎牙龈组织中发现显著的细胞凋亡发生后的特征性形态学变化。2、TUNEL细胞凋亡指数检测慢性牙周炎组牙龈组织中可见大量凋亡细胞,而正常对照组偶见少量凋亡细胞。慢性牙周炎牙龈组织中的AI(0.419±0.09),明显高于正常对照组(0.058±0.05)(P<0.05)。3、免疫组化SP法Caspase-3的表达与分布检测正常对照组仅有少量Caspase-3阳性细胞表达,慢性牙周炎组牙龈组织中Caspase-3平均光密度值(0.56±0.06),显著高于正常对照组(0.29±0.02)(t=19.510,P<0.05);平均灰度值(75.81±10.69),显著低于正常对照组(128.41±4.45)(t=-20.387,P<0.05)。和正常组相比,慢性牙周炎组牙龈组织中细胞Caspase-3表达明显增强(P<0.05)。4、免疫组化SP法Caspase-8的表达与分布检测正常对照组仅有少量Caspase-8阳性细胞表达,慢性牙周炎组牙龈组织中,Caspase-8平均光密度值(0.36±0.02),显著高于正常对照组(0.29±0.01)(t=16.381,P<0.05);平均灰度值(110.69±4.18),显著低于正常对照组(131.75±3.39)(t=-17.673,P<0.05)。和正常组相比,慢性牙周炎组牙龈组织中细胞Caspase-8表达明显增强(P<0.05)。5、慢性牙周炎牙龈组织中Caspase-3和Caspase-8阳性表达与细胞凋亡的关系慢性牙周炎患者牙龈组织中Caspase-3、8的阳性表达与AI呈正相关,各组间有统计学意义(P<0.05)。6、慢性牙周炎Caspase-3和Caspase-8表达的相互关系统计学分析显示,慢性牙周炎牙龈组织中Caspase-3和Caspase-8的阳性表达互不相关,平均光密度比较(r=0.173,P=0.479,P>0.05);平均灰度值比较(r=0.407,P=0.054,P>0.05)。结论:1、慢性牙周炎牙龈组织中细胞凋亡显著增加,表明细胞凋亡异常与慢性牙周炎的发生有一定关系。2、凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-8在慢性牙周炎牙龈组织中呈阳性表达,并且与AI呈正相关,表明Caspase-3和Caspase-8与慢性牙周炎牙龈组织细胞的凋亡关系密切,二者介导的死亡受体凋亡途径可能参与了慢性牙周炎的发病过程。3、慢性牙周炎牙龈组织中Caspase-3和Caspase-8的表达互不相关,提示细胞凋亡信号传导途径中除Caspase-8介导的死亡受体信号传导途径激活Caspase-3外,可能还存在其他凋亡途径。
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