转豇豆胰蛋白酶抑制剂基因水稻的食用安全性研究及其标记蛋白潮霉素磷酸转移酶的表达、纯化

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用表达抗虫基因cpti水稻制备的大米进行亚慢毒性实验及致畸性实验,研究其安全性及非期望效应,建立该水稻筛选标记基因hpt的原核表达体系,并进行HPT蛋白的表达、纯化,为深入评价其食用安全性提供基础.1 本研究建立了配制转基因食品饲料的计算方法,用该方法配制饲料,不仅在饲料中掺入了最大可加入的转基因食品的量,且其各营养成分与全价饲料AIN93G一致,无营养缺乏之虞.该方法可推广到其他转基因食品安全性评价的动物饲料的配制.2本研究建立了转基因食品的毒性实验包括亚慢毒性和致畸性实验的基本方法和程序,可应用到其他转基因食品的安全性评价中.本研究对转基因大米进行的动物喂养实验,未发现该转基因大米对大鼠有致畸性及其他毒副作用的结果.3对作物中含量甚微的转入基因的表达产物进行安全性评价,必须得到足量的目的蛋白.本研究探索出在原核表达体系中表达大量活性HPT蛋白的经济适用的方法,产量为100-120mg/L培养物,纯度>90%,得到的蛋白与植物中表达的蛋白在活性、分子量及免疫原性等方面基本相同,为进一步进行该外源蛋白的毒性、致敏性等研究奠定了基础.
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