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目的:观察SPATA1在雄性小鼠各组织中的表达及其在细胞内的定位，并初步探讨精子发生相关蛋白SPATA1与鞭毛内转运蛋白IFT20是否存在直接的相互作用。 方法:提取成年雄性小鼠的心、脑、脾、肺、肝、肾、肌肉、睾丸8个组织RNA，逆转录成cDNA，用RT-PCR法观察Spata1在各组织中的表达。以小鼠睾丸组织的cDNA作为模版，PCR扩增Spata1编码区序列，分别构建Spata1/pET-28a、Spata1/pEGFP-N2和Spata1/pGADT7重组质粒。利用Spata1/pET-28a重组质粒进行蛋白诱导、纯化后制备SPATA1抗体。提取小鼠8个组织及出生后不同时期的睾丸组织总蛋白，用Western-blot法观察SPATA1蛋白在各组织及不同时期睾丸组织中的表达情况。将Spata1/pEGFP-N2重组质粒分别转染至COS-1细胞和APRE19细胞，提取COS-1细胞蛋白后用Western-blot法检测融合蛋白的表达并观察SPATA1-GFP在APRE19细胞内的定位。分离成年雄性小鼠睾丸的混合生精细胞，通过免疫荧光染色法观察SPATA1在小鼠睾丸生精细胞中的定位。将Spata1/pGADT7与Ift20/pGBKT7进行酵母双杂交实验，检测两者之间是否存在直接的相互作用。用Western-blot法进一步检测SPATA1蛋白在IFT20缺失小鼠睾丸组织内的表达。 结果:PCR结果显示Spata1在睾丸、脑组织中表达。Western-blot实验发现，SPATA1蛋白在小鼠睾丸、脑、心、肾组织均有表达，蛋白分子质量为52kD。SPATA1蛋白在小鼠出生后24天开始表达，在出生后第30天开始表达丰富。SPATA1-GFP融合蛋白分子量为78kD，分布于APRE19细胞的细胞质中。细胞免疫荧光实验显示SPATA1定位于精子细胞的顶体。酵母双杂交实验显示SPATA1/IFT20混合质粒在缺少三种氨基酸(Leu、Trp、His)的培养板上有菌落生成。SPATA1蛋白在条件敲除Ift20的小鼠睾丸组织内同样表达，分子量大小不变。 结论:成功构建三组Spata1重组质粒并制备SPATA1抗体。SPATA1在睾丸组织中丰富表达，SPATA1定位于体内精子细胞的顶体和体外细胞的胞质。SPATA1与IFT20之间存在直接的相互作用关系，但是睾丸组织内IFT20蛋白的缺失不会影响SPATA1蛋白的表达。