DNA纳米技术在细胞动态控制和细胞动态成像中的应用

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Whoafraidwh0
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
细胞外基质除了为细胞提供机械支撑之外,在多种生理病理过程中都具有重要作用。目前为止人们已经开发出各种各样的基底用于研究细胞的黏附以及细胞外基质组分的功能。然而在众多的方法中,精确控制基质中相关配体的密度和取向仍然是一个巨大的挑战。在本文的研究中,我们将金表面DNA自组装单层发展成了一种可以便捷的控制细胞黏附,实现细胞图案化的基底。在研究中我们发现金表面DNA自组装单层中由组装特性不同所引起的DNA链取向的差异影响着细胞的黏附行为。而且在研究中我们也证实了DNA自组装单层用做细胞培养基底的潜在可能。另外,通过改变DNA序列中poly A的长度,我们可以控制自组装单层中DNA密度来控制细胞黏附。使用DNA核酸适配体所构建的自组装单层,界面可以感应外界环境的变化调控细胞黏附。结合DNA点样仪,我们还实现了细胞的图案化,构建出细胞阵列以及字母形细胞图案。我们的结果表明金表面DNA自组装单层具有开发成智能界面的潜在可能,可以用在细胞以及组织工程的相关研究中。控制细胞释放是细胞培养中的重要步骤,同时在体内很多生理病理过程中都涉及到细胞释放的过程,因此控制细胞释放在生物学以及生物医学等领域的研究中具有重要的意义。在体内,控制细胞释放的过程受到多种因素的控制,不同因素之间相互作用,最终引起细胞的释放。在本文中,我们在体外构建了一个细胞黏附的基底,同时我们证实DNA链置换反应可以用来实现细胞释放。该过程对细胞没有损伤,而且反应迅速。通过设计DNA序列,我们还构建了各种逻辑门来控制细胞释放以模拟体内不同因素之间的协同拮抗等作用。CRISPR-cas9系统是人们在细菌以及古细菌中发现的一种特殊的免疫机制。因为该体系的特异性和高效性,人们将该体系开发成了一种基因编辑的工具,并已经在多种生物体中成功实现了目的基因的编辑。之后通过将cas蛋白进行突变以及融合荧光蛋白,该体系又被应用到活细胞内基因位点的标记,实现了靶标基因的动态观察。在本文中,我们提出了一种基因位点多色标记的策略,通过对不同sgRNA进行体外荧光标记,我们可以对细胞内不同基因位点进行多色标记。加上我们标记方法对细胞没有损伤,我们还可以对活细胞内基因位点进行动态追踪。我们认为该方法是一个研究活细胞内基因空间分布与动态运动的有效手段,是研究基因动态调控的有效工具。自从被发现一来,端粒在细胞内的重要作用就引起了人们的广泛关注。目前荧光显微观察是研究端粒的主要方法。然而普通荧光显微镜的分辨率受到了光学衍射极限的限制。近年来超分辨显微术的发展使人们可以在更高的分辨率水平上对目标进行观察。在本文中,我们使用受激发射损耗显微镜对间期细胞核中荧光标记的端粒进行了观察。结果表明,与激光共聚焦荧光显微镜相比,使用受激发射损耗显微镜所得到的荧光图片中端粒荧光斑点的尺寸更加小。而且一些由于位置较近而无法区分开来的端粒在超分辨图像中可以被清楚的区分开。因此,通过使用超分辨显微术,我们可以得到更多之前无法得到的关于端粒的信息。
其他文献
该文主要研究了导向剂法Ti-Beta沸石分子筛的合成及水热体系下新型磷酸锌微孔晶体的合成与结构表征.以1.2丙二胺为模板剂,合成出一种层状微孔磷酸锌晶体,对晶体进行了单晶结
采用本体开环聚合法合成了不同分子量和单体比例的三个系列的聚-D,L-乳酸-聚乙醇酸、聚-ε-己内酯-聚乙二醇、聚-D,L-乳酸-聚乙二醇共聚物(Poly-DL-lactide-poly(ethylene gl
期刊
合成两类含有烯烃基团的镍系烯烃聚合催化剂.一类是含有酚亚胺的中性镍系烯烃聚合催化剂,测定了其中两个催化剂的单晶结构,研究了这类化合物作为单组分催化剂催化乙烯聚合反
铝是地壳中含量最丰的金属元素。过去人们认为铝对人体而言是无毒的微量元素,其低毒性的原因主要是来自肠胃对铝的吸收很差。然而,随着酸雨这一世界性污染问题的出现,铝制炊具的
为了深入研究这一著名传统中药的化学成分和寻找新的天然活性物质,我们对采自贵州的金钗石斛地上部分的脂溶性部位进行了比较系统的化学成分研究.对从金钗石斛(D.nobile)中分
本文以餐饮品牌设计中文化元素的运用作为探索思路,分析了中国传统文化元素与现代餐饮品牌两者之间的关系,论述了餐饮食品牌中运用中国传统文化元素,为品牌自身的发展和价值
该文以正硅酸乙酯和硝酸盐作为原料,采用溶胶-凝胶的方法,通过控制灼烧温度和时间,合成了CaY(SiO4)O:Eu,MGdxY(SiO)O:0.1RE(M=Ca,Sr;RE=Dy,Eu,Sm)纳米晶(~50nm)和微米晶(
作为新型癌症治疗方法,光动力疗法(PDT)和光活化化学疗法(PACT)以对癌组织的高选择性和对正常组织低的毒副作用等优势而被广泛关注。PDT依靠光敏剂光照后产生的活性氧物种(ROS
分子印迹聚合物(MIP)近近年来发展起来的具有分子识别能力的新型功能材料,广泛应用于手性分离,生物模拟传感器,模拟催化剂,人工抗体和受体等领域.该论文的研究目标是用分子印