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目的脓毒症致急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)是临床急需解决的难点。目前,脓毒症致AKI发病的具体机制尚未完全阐明,我们对脓毒症致AKI的病理生理学认识仍存在很大不足,深入探究脓毒症致AKI的发病机理,对于改进和优化临床诊疗策略、改善患者预后具有重要意义。本课题拟探究mi R-494在脓毒症致AKI中的作用及相关机制。方法(1)mi R-494在脓毒症致AKI患者中的表达水平选取我院93例脓毒症患者,分为脓毒症致AKI组(n=31)和非AKI组(n=62),q RT-PCR检测患者外周血中mi R-494的水平。(2)mi R-494在脓毒症致AKI中的作用机制24只wistar大鼠随机平均分为对照组、LPS组、LPS+mi R-494抑制剂组和LPS+阴性对照组,以LPS诱导脓毒症致AKI模型。分别以q RT-PCR检测肾组织中mi R-494的水平,称重法测定肾指数,生化分析仪检测血清BUN、Cr,HE染色观察肾组织病理学变化,ELISA法和q RT-PCR检测TNF-α、IL-1β、IL-6水平,硝酸还原酶法检测NO含量,试剂盒检测MDA、SOD、GSH含量,DHE法测定ROS水平,Western blot检测磷酸化IKKα/β、IκBα、caspase-3、Bax、Bcl-2在总蛋白中的表达以及p65 NF-κB在胞浆和核蛋白中的表达,免疫组织化学法观察p65 NF-κB在肾组织中的表达,TUNEL染色观察肾小管上皮细胞凋亡。结果(1)与非AKI患者相比,脓毒症致AKI患者外周血中mi R-494表达水平显著升高(P<0.05)。mi R-494诊断脓毒症致AKI的敏感性为80.65,特异性为96.77,显示了较好的诊断效果。(2)与对照组相比,LPS刺激可显著增加大鼠肾组织mi R-494的表达水平(P<0.05);升高大鼠的肾指数、血清BUN和Cr水平(P<0.05);引发大鼠肾脏组织明显的病理损伤、增加大鼠的肾脏组织损伤评分(P<0.05);增加大鼠肾组织IKKα/β和IκBα的磷酸化水平、降低p65 NF-κB在胞浆的表达水平、增加p65NF-κB在核内的表达水平(P<0.05);增加大鼠血清及肾组织TNF-α、IL-1β、IL-6的表达及m RNA水平(P<0.05);增加大鼠肾组织MDA、NO、ROS的表达水平、降低SOD、GSH的表达水平(P<0.05);增加大鼠肾小管上皮细胞的凋亡数、增加肾组织Caspase-3和Bax的表达水平、降低肾组织Bcl-2的表达水平(P<0.05)。(3)与LPS组相比,mi R-494抑制剂可显著降低大鼠肾组织mi R-494的表达水平(P<0.05);降低LPS刺激的大鼠肾指数、血清BUN和Cr水平(P<0.05);改善大鼠病理组织学、降低LPS刺激的大鼠肾脏组织损伤评分(P<0.05);降低大鼠肾组织IKKα/β和IκBα的磷酸化水平、增加p65 NF-κB在胞浆的表达水平、降低p65 NF-κB在核内的表达水平(P<0.05);降低大鼠血清及肾组织TNF-α、IL-1β、IL-6的表达及m RNA水平(P<0.05);降低大鼠肾组织MDA、NO、ROS的表达水平、增加SOD、GSH的表达水平(P<0.05);降低大鼠肾小管上皮细胞的凋亡数、降低肾组织Caspase-3和Bax的表达水平、增加肾组织Bcl-2的表达水平(P<0.05)。阴性对照组对LPS刺激的大鼠以上参数均无明显影响(P>0.05)。结论脓毒症AKI患者外周血中mi R-494表达水平明显升高。动物实验证明,抑制mi R-494可通过抑制NF-κB信号通路降低炎症因子水平、抑制氧化应激、缓解肾组织损伤、改善肾功能、减少肾小管上皮细胞凋亡,起治疗脓毒症AKI的作用。