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背景和目的胃癌是世界上最常见的消化道恶性肿瘤。胃肠激素的体内调节对胃癌发生和发展起着关键性作用,在众多的相关因子中生长抑素(somatostatin,SST)受到广泛关注。生长抑素是一个对外分泌、内分泌、旁分泌及自分泌均起作用的调节肽。大多数研究表明,SST及生长抑素类似物(Somatostatin Analogs,SSTA)在许多肿瘤细胞中抑制增殖,但也有学者指出不同浓度的SSTA(1μg/L-200μg/L)可以刺激胃癌细胞生长,这提示SST在不同肿瘤中的作用不同且机制不明。本研究利用慢病毒过表达SST,观察胃癌细胞超微结构的变化及对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响,探讨SST在Wnt/β-catenin信号通路中作用机制及其与上皮间质转化(epithelial-MesenchymalTransition,EMT)的关系,为临床治疗提供新靶点。方法1.利用第二代慢病毒过表达载体系统,将PCMV-dR8.2dvpr、PCMV-VSV-G、PHBLV-SST三质粒共转染HEK293T细胞,收取细胞上清液获得病毒颗粒,将复制缺陷型慢病毒载体颗粒直接用于感染胃癌细胞BGC823、SGC7901、MGC803。2.采用实时荧光定量PCR技术和蛋白质免疫印迹技术验证SST胃癌细胞株在mRNA和蛋白水平表达量的变化。3.检测过表达SST基因对胃癌细胞BGC823、SGC7901、MGC803细胞器的变化。利用透射电子显微镜观察胃癌细胞器中线粒体、内质网、以及高尔基体的变化。4.检测过表达SST基因对胃癌细胞BGC823、SGC7901、MGC803增殖、迁移和侵袭能力等行为功能学的影响。利用MTT实验检测细胞的增殖能力;划痕实验检测细胞的迁移能力;Transwell实验检测细胞的侵袭能力。5.检测过表达SST基因对胃癌细胞BGC823、SGC7901、MGC803上皮间质转化的影响。通过蛋白质免疫印迹技术检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和β-catenin的蛋白表达量变化。6.探讨SST基因对上皮间质转化的影响是否由Wnt/β-catenin信号通路介导。加入Licl试剂,激活Wnt/β-catenin信号通路。通过蛋白质免疫印迹技术检测 β-catenin、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin 的蛋白表达量变化。结果1.成功建立过表达SST的胃癌细胞BGC823、SGC7901、MGC803细胞株。2.过表达SST影响胃癌细胞BGC823、SGC7901、MGC803细胞器形态。3.过表达SST在一定程度上抑制胃癌细胞BGC823、SGC7901、MGC803的增殖、迁移和侵袭能力。4.过表达SST在一定程度上逆转上皮间质转化。5.SST可能通过Wnt/β-catenin信号通路影响上皮间质转化。结论SST可通过Wnt/β-catenin信号通路调控上皮间质转化抑制胃癌细胞BGC823、SGC7901、MGC803的增殖、迁移和侵袭。