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动物体生长发育主要受GH-GHR-IGFs生长调节轴的影响,而生长激素受体(GHR)在其中处于中心地位。GHR除了介导IGF-I依赖性的生长调控作用,还可以直接作用于靶器官,介导非IGF-I依赖性的糖类、脂类和蛋白质代谢过程,从组织系统上参与到生物体整个生命代谢调控进程中,对生物体生长发育、形态建成和机体稳态的维持起着十分重要的作用。为探讨猪GHR基因及其表达调控与体型性状的关系,本试验选取体型矮小的广西巴马小型猪为研究对象,并以体型高大的猪品种长白猪为对照,对广西巴马小型猪和长白猪的GHR血清含量、基因编码区序列、mRNA时空表达和转录调控等方面进行了比较研究,试验结果如下:1.在1和180日龄,长白猪血清GHR和IGF-I含量显著高于巴马小型猪(P<0.05);但在30日龄,二者血清GHR和IGF-I含量没有显著差异(P>0.05);各日龄猪的血清GHR含量与IGF-I含量的变化趋势一致。血清GH含量在各日龄猪中变化不大,也没有表现出品种差异(P>0.05)。2.克隆得到的巴马小型猪GHR基因编码区序列发现有6处碱基突变,其中有2处导致氨基酸发生改变:第1225位点由丙氨酸→丝氨酸;第1801位点由缬氨酸→异亮氨酸,其它突变为同义突变。分别构建了巴马小型猪和长白猪GHR过表达载体并转染细胞,定量检测GHR调控的下游基因JAK2的表达量,发现长白猪GHR过表达载体组JAK2的表达量极显著高于巴马小型猪组(P<0.01),说明巴马小型猪与长白猪GHRCDS序列差异可能是造成二者GHR基因作用差异的一个原因。3.在巴马×长白猪F2资源家系中对G1248A和A1801G两个SNPs位点进行与生长性状的关联分析,结果表明pGHR/1248位点2月龄GG和AG基因型个体胸围较AA型大,4月龄GG和AG基因型个体体重显著大于AA型个体(P<0.05);pGHR/1801位点3月龄和6月龄GG和AG基因型个体胸围较AA型大,1月龄和6月龄AA基因型个体体高较AG、GG型高,且达显著水平(P<0.05);结合两位点进行haplotype分析,发现1月龄-AAAA-和-AGAG-型个体体高较-GGGG-型高,4月龄-GGGG-型个体体重较-AAAA-和-AGAG-型重,6月龄-GGGG-型个体胸围较-AAAA-和-AGAG-型大,且达显著水平(P<0.05)。4.实时荧光定量PCR检测巴马小型猪和长白猪mRNA的时空表达:不同日龄心、肝、肌肉、脾、肾和脑组织中GHR和IGF-I的表达量存在品种差异;GHR和IGF-I的表达量在各个组织中符合生长发育规律,并且IGF-I的表达水平受GHR影响,与之相平行。推测GHR表达水平低可能与巴马小型猪表现出的生长缓慢和体型矮小有密切关系。5.克隆得到GHR基因5’-1A和1B两种mRNA和巴马小型猪3 ’ cDNA全长序列,序列比对发现这些5’和3’调控序列不存在品种差异,而180日龄巴马小型猪GHR-1A表达量低于长白猪;分段扩增获得巴马小型猪ATG上游启动子区2700 bp调控序列,长白猪2696 bp调控序列;序列分析发现二者在存在较大差异:巴马小型猪在733-735 bp缺失3个碱基,1909-1915 bp插入7个碱基,并且还存在很多差异SNP位点,形成差异转录因子结合位点从而影响GHR和相关基因的转录调控和表达;构建广西巴马小型猪启动子区活性检测载体GHR-P1-EGFP和GHR-P2-EGFP,通过细胞转染荧光检测表明GHR基因启动子区1507 bp和1603 bp片段是具有基因转录启动活性的;巴马小型猪和长白猪不同日龄肝脏和肌肉启动子区CpG岛甲基化程度存在品种差异,其中在180日龄肝脏表现差异极显著(P<0.01),推测GHR基因甲基化程度主要与肝脏mRNA的转录调控相关。