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冠心病抑郁症是一组发病机制不明、多系统共病的临床综合征,以胸闷、胸痛、情绪低落、悲观抑郁等为主要表现,严重影响患者身心健康,其发病率高、诊断率低、缺乏有效防治方法、易出现意外事件等是防治的难题与关键。冠心病与抑郁症相互影响,临床表现错综复杂,常规采用冠心病药物联合抗抑郁、镇静药物治疗,可一定程度缓解症状,然而部分抗抑郁药物容易诱发心肌缺血、心律失常,影响冠心病预后。导师曹洪欣教授通过30余年理论与临床研究,认为阳虚痰瘀是冠心病核心病机,提出温阳益心法为治疗冠心病基本大法,创立代表方剂温心方,临床和实验研究表明温阳益心法可以有效改善冠心病症状,预防心血管意外事件发生。导师根据冠心病抑郁症患者临床症状,在温心方基础上配伍行气解郁、重镇安神之品,可温阳补气益心、活血化痰通脉、解郁宁心安神,明显改善患者身心症状。本课题组前期研究证实,温阳益心法可以上调冠心病抑郁症模型糖水偏爱指数,增加旷场实验进入中央区次数和时间,减少强迫游泳实验不动时间,显著改善抑郁状态;促进海马五羟色胺、多巴胺、脑源性神经营养因子、酪氨酸激酶受体B蛋白表达,发挥保护海马神经元、突触可塑性作用。现代医学研究表明,炎症影响神经、内分泌、免疫调节,是冠心病抑郁症核心发病机制之一。目的:本研究通过动物实验探讨温阳益心法调控NLRP3炎症小体抑制冠心病抑郁症炎症作用机制。1.使用高脂饲料喂养ApoE-/-小鼠结合慢性不可预知温和应激的方法制备冠心病抑郁症模型;2.比较冠心病抑郁症、冠心病、抑郁症小鼠NLRP3炎症小体相关蛋白和mRNA表达差异;3.观察温阳益心法对冠心病抑郁症小鼠NLRP3炎症小体相关蛋白和mRNA表达变化,为温阳益心法治疗冠心病抑郁症提供科学依据。方法:ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养12周建立冠心病模型,ApoE-/-小鼠慢性不可预知温和应激4周建立抑郁症模型,ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养结合慢性不可预知温和应激16周建立冠心病抑郁症模型。将造模成功的冠心病抑郁症小鼠模型随机分为6组,分别为冠心病抑郁症组（等剂量纯净水）、温心方高剂量组（47.84g/kg/d）、温心方中剂量组（23.92g/kg/d）、温心方低剂量组（11.96g/kg/d）、西药组（盐酸氟西汀2.6mg/kg/d和阿托伐他汀钙1.3mg/kg/d）,激动剂组（腹腔注射三甲胺N-氧化物25μg/kg+温心方23.92g/kg/d）,使用C57BL/6小鼠作为空白组（等剂量纯净水）,连续灌胃28天后进行指标检测。采用糖水偏好实验糖水消耗占比和强迫游泳实验、悬尾实验不动时间评估小鼠抑郁行为;HE染色观察小鼠主动脉动脉粥样硬化病变形态并计算斑块占比评估小鼠主动脉病变情况;免疫组化染色观察海马CA1区小胶质细胞活化情况;TUNEL染色评估神经元凋亡情况;ELISA 法检测血清 IL-1β、IL-6、IL-10、IL-18 含量;Western Blot 检测小鼠主动脉、海马NLRP3、ASC、Caspase-1、NF-κB p65蛋白表达;采用RT-PCR法检测小鼠主动脉、海马 NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18、NF-κB mRNA表达。结果:1.冠心病抑郁症组小鼠糖水消耗占比显著降低（P＜0.01）,强迫游泳和悬尾实验不动时间显著增加（P＜0.01）;主动脉可见明显粥样硬化斑块沉积,斑块面积占比显著增加（P＜0.01）,心电图见明显的ST段升高。2.冠心病抑郁症组小鼠海马Iba-1阳性细胞数量、TUNEL阳性细胞数目显著增加（P＜0.01,P＜0.01）;血清IL-1β、IL-6、IL-18含量显著升高（P＜0.01）,IL-10含量显著降低（P＜0.01）;主动脉 NLRP3、ASC、Caspase-1,海马 NLRP3、Caspase-1、NF-κB p65 蛋白表达显著增加（P＜0.01）,主动脉NF-κB p65、海马ASC蛋白表达增加（P＜0.05）;主动脉 ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18,海马 NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA表达显著升高（P＜0.01）,主动脉NLRP3、NF-κB mRNA表达升高（P＜0.05）。3.温心方高剂量组可显著升高糖水消耗占比（P＜0.01）,显著减少悬尾实验不动时间（P＜0.01）,减少强迫游泳实验不动时间（P＜0.05）;显著降低海马CA1区小胶质细胞活化、神经元凋亡数目（P＜0.01）,减少主动脉斑块面积占比（P＜0.05）;显著降低主动脉NLRP3、ASC、Caspase-1、NF-κB p65,海马NLRP3、Caspase-1蛋白表达（P＜0.01）;降低海马NF-κB p65蛋白表达（P＜0.05）;显著降低主动脉、海马 NLRP3、ASC、Caspase-1、NF-κB mRNA表达（P＜0.01）,降低主动脉、海马IL-1βmRNA表达（P＜0.05）。4.使用NLRP3炎症小体激动剂三甲胺N-氧化物后,激动剂组与温心方中剂量组比较,主动脉NLRP3、Caspase-1、NF-κB p65蛋白表达显著升高（P＜0.01）,海马Caspase-1、NF-κB p65蛋白表达升高（P＜0.05）。结论:1.通过高脂饲料喂养结合慢性不可预知温和应激,ApoE-/-小鼠主动脉呈现典型动脉粥样硬化病理特征,斑块面积占比显著增加,心电图见明显ST段抬高,主动脉狭窄;糖水偏好实验糖水消耗占比明显下降,强迫游泳实验、悬尾实验不动时间显著延长,出现显著的抑郁行为,表明高脂饲料喂养ApoE-/-小鼠结合CUMS方法可以成功制备冠心病抑郁症小鼠模型;2.冠心病与抑郁症可通过NLRP3炎症小体激活相互影响,加重主动脉、海马炎症反应;3.温阳益心法可降低斑块面积占比,减轻主动脉粥样硬化,抑制小胶质细胞活化、海马神经元凋亡,改善主动脉、海马组织病理形态,缓解冠心病抑郁症小鼠抑郁状态;4.温阳益心法通过下调主动脉、海马NLRP3、ASC、Caspase-1、NF-κB蛋白和mRNA表达,降低血清炎症因子IL-1β、IL-18含量,抑制NLRP3炎症小体激活,减轻主动脉、海马炎症反应,有效干预冠心病抑郁症。