乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）导致急慢性乙型肝炎，并与肝硬化和肝细胞癌（Hepatocelluar carcinoma，HCC）的发生发展密切相关。近年来由于脂肪性肝病（Fatty liver disease，FLD）的发病率逐年增加，导致脂肪肝与慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）合并存在的病例明显增多，对两者相关性的研究逐渐受到重视。但是迄今为止，HBV与脂肪肝的关系尚未完全阐明。本课题组先前通过蛋白质组学和MALDI-TOF/TOF MS技术研究发现HBV影响肝细胞载脂蛋白（Apolipoprotein，Apo）的表达，并降低NAD(P)H醌氧化还原酶1（NAD(P)H dehydrogenase:quinone1，NQO1）的表达，现有研究表明上述因子参与脂肪酸的合成和代谢，对肝脏脂质代谢动态循环平衡的维持起着重要的作用。本研究在此基础上，探讨HBV编码蛋白（LHBs、MHBs、HBs、HBc、HBe、HBpol、HBx）与特定宿主细胞中载脂蛋白表达的对应关系，进一步探讨HBV影响NQO1致肝细胞脂肪化的机制，有助于更深入了解HBV的致病机制，为有效地进行脂肪肝的防治提供理论基础。本研究第一部分旨在探讨HBV整体水平对Apo基因的影响。通过对HBV细胞株和pRep-HBV质粒瞬时转染细胞中HBsAg及HBeAg的检测，确定HBV基因组的正常复制和表达；通过realtime RT-PCR的方法，检测了16种Apo基因在HepG2.2.15及HepG2细胞中表达的差异，并进一步用瞬时转染的方法在Huh7、HepG2和Hep3B细胞进行验证，结果表明ApoAI，ApoAII，ApoAV，ApoB，ApoCIII，ApoE，ApoF，ApoH，ApoJ，ApoL1和ApoM和对照组相比转录水平均明显降低，APOD的转录水平和对照组相比明显升高；通过检测不同时间点HBV表达量对上述Apo基因转录水平的影响，证实HBV表达量对Apo基因的表达影响具有时间效应。本研究第二部分应用AdEasy XL System构建HBV七种编码蛋白的重组腺病毒表达载体Ad-LHBs、Ad-MHBs、Ad-HBs、Ad-HBc、Ad-HBe、Ad-HBpol、Ad-HBx及对照空病毒Ad-GFP，探讨HBV编码蛋白对特定宿主细胞中Apo基因表达的对应关系。通过对腺病毒包装过程的监测和Westernblot检测，成功构建可分别表达HBV LS、MS、S、Core、E、Pol、 X蛋白的重组腺病毒；通过realtime RT-PCR检测HBV七种编码蛋白对Apo基因的表达影响，我们发现HBs下调ApoAII的转录水平，MHBs下调ApoF的转录水平，HBpol下调ApoH的转录水平，且均与HBV整体水平结果一致；通过western blot进一步检测ApoAII、ApoF和ApoH基因蛋白水平的变化，发现HBs下调ApoAII蛋白水平，与转录水平一致；MHBs和HBpol分别上调ApoF和ApoH的蛋白水平，与转录水平不一致，我们考虑可能存在转录、转录后水平、翻译和翻译后水平的多种组合调控，具体机制有待进一步的研究。本研究第三部分旨在探讨HBV特别是HBx抑制NQO1致肝细胞脂肪化的机制。通过对活细胞内源性ROS和超氧化物的检测，证实HBx通过抑制NQO1的表达从而诱发细胞的氧化应激；通过对细胞内抗氧化酶还原性谷胱甘肽GSH的检测，表明过量的ROS产生可能会破坏细胞内的抗氧化防御体系；应用Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡的发生，证实过量的ROS蓄积引起细胞凋亡；同时通过采用CCK-8检测H2O2处理后细胞的生存率，表明HBx抑制NQO1表达使细胞对H2O2引起的细胞毒性反应更敏感；通过线粒体Δψm和ATP水平的检测我们发现NQO1参与了HBx诱发的线粒体损伤作用。