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目的:通过建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,观察参麦注射液预处理对肾缺血再灌注损伤大鼠组织病理学结构、肾功能、Toll样受体4(TLR4)信号转导通路及抗氧化能力的影响,初步探讨参麦注射液对肾缺血再灌注损伤的保护机制,为临床防治肾缺血再灌注损伤提供一种新的途径。
方法:选用雄性健康Sprague-Dawley(SD)大鼠36只,随机分为假手术对照组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、参麦注射液预处理组(IR+SM组),每组12只。建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型。建模成功后分别取标本进行检测:(1)全自动生化仪检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平;(2)HE染色光镜下观察肾组织病理学结构变化;(3)实时荧光定量PCR法检测肾组织TLR4、核因子-κBp65(NF-κBp65)mRNA水平;(4)ELISA法检测血浆细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;(5)TBA法检测血浆丙二醛(MDA)含量,WST-1法检测血浆超氧化物歧化酶(SOD)活力。
结果:
1)与Sham组比较,IR组血清BUN和Cr水平均升高(P<0.05),肾功能受损严重,肾组织病理学结构损坏明显,有统计学意义;与IR组比较,IR+SM组血清BUN和Cr水平降低(P<0.05),肾功能受损较轻,肾组织病理学结构损坏不明显,有统计学意义。
2)与Sham组比较,IR组肾组织TLR4、NF-κBp65mRNA表达和血浆TNF-α、ICAM-1表达均升高(P<0.05),有统计学意义;与IR组比较,IR+SM组肾组织TLR4、NF-κBp65mRNA表达和血浆ICAM-1、TNF-α表达均降低(P<0.05),有统计学意义。
3)与Sham组比较,IR组血浆MDA含量升高,SOD活力减弱(P<0.05),有统计学意义;与IR组比较,IR+SM组的MDA含量降低,SOD活力增强(P<0.05),有统计学意义。
结论:此研究证实参麦注射液预处理对肾缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能是通过抑制炎症因子ICAM-1、TNF-α表达,阻断TLR4/NF-κB信号途径,增强对氧自由基的清除,降低脂质过氧化,从而减轻肾缺血再灌注对机体造成的损伤。这些结果为我们进一步研究参麦注射液在肾缺血再灌注损伤中所起的作用提供实验依据,并为临床预防与治疗肾缺血再灌注损伤提供新的思路。