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目的:通过多柔比星诱导心肌细胞损伤，观察S100B在心肌细胞中的表达变化以及心肌细胞凋亡水平的改变，探讨S100B在多柔比星诱导心肌细胞损伤中的可能作用。
方法:(1)用胰蛋白酶和差速贴壁法分离、纯化新生1d的SD大鼠心肌细胞。(2)用2μmol/L多柔比星处理培养72h的心肌细胞，对不同时间点(0.5、1、2、4h)进行检测，建立心肌细胞S100B表达模型(3)体外培养的细胞随机分为对照组(CON)，多柔比星损伤组(DOX)，多柔比星+阴性siRNA组(DNC)，DOX+S100B-siRNA组(DSB)。用脂质体RNiMAX将S100B-siRNA转染到心肌细胞后48小时，多柔比星(2.0μmol/L)处理2小时。(4)α-横纹肌肌动蛋白(α-SA)免疫细胞化学染色法鉴定心肌细胞纯度;四甲基噻唑蓝（MTT法）测定每组心肌细胞的存活率;AnnexinV/PI流式细胞术检测每组心肌细胞的凋亡率;蛋白印迹法(Westernblot)检测每组心肌细胞S100B蛋白表达变化。
结果:(1)用胰酶消化法以及差速贴壁法分离培养、纯化的心肌细胞状态良好、纯度高，培养第3d其纯度可达90％。(2)多柔比星(2μmol/L)诱导心肌细胞0.5、1.0、2.0、4.0h后S100B表达量分别为(0.13±0.02;0.38±0.05;0.49±0.05;0.30±0.08)，与正常组（0.00±0.00）相比差异有统计学意义（P＜0.05）;2μmol/L多柔比星诱导心肌细胞2h可高表达S100B(P＜0.05)(3)MTT测定显示，DNC组存活率与DOX存活率相比差异无统计学意义[（77.2±5.4）％vs（80.5±3.2）％，P＞0.05];DSB组与DOX组相比，其存活率增加[（86.5±2.8）％vs（80.5±3.2）％，P＜0.05]。(4)流式细胞术分析表明，DOX组细胞凋亡率与DNC组凋亡率相比，差异无统计学意义[(4.54±0.32)％vs(4.72±0.30)％，P＞0.05];与DOX组相比DSB组凋亡率降低[(2.38±0.19)％vs(4.54±0.32)％，P＜0.01]。(5)蛋白印迹检测显示，DOX组与DNC组相比，差异无统计学意义[(0.63±0.08)vs(0.66±0.07)，P＞0.05];DSB组与DOX组相比，S100B蛋白表达下降[(0.26±0.08)vs(0.63±0.08)，P＜0.01]。
结论:正常生理条件下心肌细胞不表达S100B;S100B在多柔比星诱导损伤的心肌细胞中表达明显增加并且可能促进心肌细胞凋亡。