【摘 要】
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肠球菌是存在于动物胃肠道内的正常菌群,也多在食品或饲料添加剂中使用,然而在免疫功能低下的宿主中,该菌可作为一种机会性病原体,通过分泌粘附素粘附于组织,与其它潜在有害因子相互作用,引起奶牛子宫蓄脓、羔羊脑炎等多种疾病,甚至导致死亡,严重危及动物的健康。由于抗菌药物的滥用及超剂量使用,导致肠球菌耐药性增强,并出现耐多种抗菌药物的肠球菌,这加剧了疾病的发生以及治疗的难度。本研究通过检测银川地区不同动物源
【基金项目】
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国家自然科学基金项目“宁夏地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌生物被膜形成能力及其与耐药性的相关性研究(No.31760748)”
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肠球菌是存在于动物胃肠道内的正常菌群,也多在食品或饲料添加剂中使用,然而在免疫功能低下的宿主中,该菌可作为一种机会性病原体,通过分泌粘附素粘附于组织,与其它潜在有害因子相互作用,引起奶牛子宫蓄脓、羔羊脑炎等多种疾病,甚至导致死亡,严重危及动物的健康。由于抗菌药物的滥用及超剂量使用,导致肠球菌耐药性增强,并出现耐多种抗菌药物的肠球菌,这加剧了疾病的发生以及治疗的难度。本研究通过检测银川地区不同动物源肠球菌的毒力基因及耐药情况,探究肠球菌在临床上的致病性,为兽医临床治疗肠球菌引起的感染提供理论依据。本研究包括三部分内容:1、从银川地区不同养殖场、宠物医院采集动物的肛门拭子,采用肠球菌显色培养基、革兰氏染色镜检和双重PCR扩增16S rRNA、ent基因分离鉴定肠球菌,通过PCR方法检测ace、asa1、esp、efaA、gelE、cylA、agg、fsr 8种毒力基因。结果显示,共分离鉴定出400株肠球菌;检测出的8种毒力基因中esp和ace的检出率最高,分别为78%和74.75%,cylA基因的检出率最低,为15.5%,且在猪源、牛源肠球菌中未检测到;四种动物中犬源肠球菌毒力基因的检出率最高,牛源最低。2、采用CLSI推荐的纸片琼脂扩散法检测肠球菌对14种抗菌药物的敏感性。结果显示,400株肠球菌对磺胺甲噁唑的耐药率最高,其次对头孢噻肟和头孢西丁耐药率也高达99%和96%;对左氧氟沙星和氨苄西林敏感率较高,均在80%以上,对万古霉素全部敏感;银川地区猪源、鸡源、牛源和犬源肠球菌多药耐药情况严重,其多药耐药率分别为98%、94%、92%和98%。3、依据毒力基因的检测结果,筛选出3株含不同毒力基因的肠球菌进行小鼠感染试验,测定其半数致死量(LD50),并通过病理切片观察分析该菌的致病性。结果表明,肠球菌致病性较低,菌株 EV1、EV2、EV3 的 LD50分别为 8.71×109 cfu、2.34×1010 cfu、9.33×1010cfu;病理组织学观察可见感染感染小鼠的心静脉淤血;肺泡间隔增厚,肺泡腔有积血,血管充血出血;肾小球萎缩,肾小管上皮细胞水泡变性,肾间质充血等现象。综上所述,本研究通过对银川地区不同动物源肠球菌进行耐药性和毒力基因检测以及致病性分析,揭示了本地区不同动物源的肠球菌耐药现状及致病情况,为指导临床合理用药提供理论依据,并为进一步研究肠球菌的致病性奠定基础。
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