真核生物细胞中，核小体是染色质的基本重复单元，由一段约146bp的DNA缠绕在组蛋白八聚体构成。在DNA复制过程中，核小体在复制叉附近发生去组装和重新组装。组蛋白分子伴侣ASF1参与了组装过程中的组蛋白递放过程。其中，ASF1通过其N端的保守区域结合组蛋白(H3-H4)异二聚体，并阻碍其形成四聚体。在HeLa细胞核提取物中，可检测到ASF1的同源蛋白ASF1a和ASF1b通过H3-H4与MCM复合体形成复合物。MCM复合体包含6个组分，MCM2-7，是一种DNA解旋酶，在DNA复制的起始、延伸和终止过程中都发挥重要的作用。体外结合实验表明，MCM2通过其N端的组蛋白结合区域(HBD)直接与H3-H4相互作用。但是MCM2-HBD如何结合组蛋白H3-H4以及ASF1是如何通过H3-H4结合MCM2的分子机制尚不清楚。我们体外组装了MCM2-H3-H4三元复合物和MCM2-H3-H4-ASF1四元复合物，并解析了后者3.5(A)分辨率的晶体结构，揭示了MCM2和ASF1分别与(H3-H4)二聚体的相互作用的结构细节。发现即使在MCM2存在的情况下，ASF1也能有效地阻碍(H3-H4)2四聚体的形成，而MCM2与H3-H4的结合不受ASF1的影响。MCM2与ASF1将一个(H3-H4)异二聚体包裹起来，阻碍了H3-H4与其它的组蛋白或DNA发生相互作用。并进一步推测了MCM2-ASF1-H3-H4复合体的主要作用是维持在复制叉附近的组蛋白H3-H4的供求平衡，参与一部分新合成的H3-H4的入核转运，并可能在MCM2-7复合物的介导下直接将H3-H4递放到DNA上。　　Dot1是一种不含SET结构域的组蛋白甲基转移酶，能催化组蛋白H3K79位的单、双和三甲基化修饰，其催化活性需要以核小体为底物，但这种底物特异性的分子机制尚不明确。期望在体外组装锥虫的Dot1与核小体的复合物，并拟通过结构生物学的方法来研究Dot1识别核小体的结构机理及催化反应底物特异性的分子机制。虽然成功获得了锥虫的Dot1a、Dot1b蛋白并体外组装了锥虫的核小体，但体外条件检测不到Dot1a和Dot1b与锥虫核小体的结合。进一步检测发现Dot1a可以结合酵母的核小体，并体外组装了Dot1a和酵母核小体的复合物，进行了结晶筛选，得到了可衍射的晶体，还需要进一步检验。