目的:本论文以松针精油作为青贮添加剂,研究松针精油对苜蓿青贮品质的影响,并以青贮饲料中的嗜酸乳杆菌、串珠镰刀菌和梭状芽孢杆菌作为指示菌种,探索松针精油的抑菌效果和抑菌机制,从而初步阐明松针精油对苜蓿青贮品质及微生物的影响。方法:本论文共分为三个试验,具体方法如下:试验一:松针精油对苜蓿青贮品质的影响。苜蓿鲜草于6月份初花期（第二茬）收割,凋萎3小时。试验分4组进行,在苜蓿中分别添加0 mg/kg（CON）,160 mg/kg（PNE1）,320 mg/kg（PNE2）,480 mg/kg（PNE3）的松针精油,制作青贮饲料。青贮60 d后,取样进行物理、化学和微生物分析。试验二:松针精油对青贮饲料中3种微生物的抑菌效果。以影响青贮品质的嗜酸乳杆菌、串珠镰刀菌和梭状芽孢杆菌作为供试菌株,研究松针精油对供试菌株的最低抑菌浓度、抑菌圈直径和生长曲线的影响。试验三:松针精油对串珠镰刀菌和梭状芽孢杆菌的抑菌机理。以串珠镰刀菌和梭状芽孢杆菌为研究对象,通过菌体形态结构、细胞内容物释放量、细胞膜脂肪酸含量、细胞膜蛋白构象、苹果酸脱氢酶活性、蛋白质表达、DNA含量、DNA拓扑异构酶活性以及DNA限制性酶切图谱等方面探索松针精油的抑菌机理。结果:试验一:（1）与CON组相比,添加松针精油提高了苜蓿青贮的粗蛋白质含量（P<0.05）,降低了中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量（P<0.05）,而对干物质含量没有影响（P>0.05）。（2）各松针精油组苜蓿青贮的p H、氨态氮/总氮值显著低于CON组（P<0.05）,水溶性碳水化合物含量显著高于CON组（P<0.05）。PNE2和PNE3组的乳酸含量显著高于CON组（P<0.05）。与CON组相比,添加松针精油使苜蓿青贮的乙酸水平显著降低（P<0.05）,但各松针精油处理组间乙酸含量无显著差异（P>0.05）。PNE3组丙酸含量高于CON组、PNE1和PNE2组（P<0.05）,CON组、PNE1组和PNE2组间丙酸含量无显著差异（P>0.05）。各松针精油组苜蓿青贮中均未检测到丁酸。（3）与CON组相比,各松针精油组苜蓿青贮中乳酸菌的数量显著增加（P<0.05）,酵母菌和好氧细菌的数量显著降低（P<0.05）,未检测到霉菌。添加松针精油显著提高了苜蓿青贮的有氧稳定性（P<0.05）。试验二:松针精油对嗜酸乳杆菌没有抑制作用,对串珠镰刀菌和梭状芽孢杆菌具有较强的抑制效果,其最低抑菌浓度分别为4.1125 mg/m L和16.4500 mg/m L,并且最大浓度抑菌圈直径分别为15.52 mm和9.46 mm。与对照组相比,精油组中串珠镰刀菌和梭状芽孢杆菌的迟缓期延长,对数生长期缩短,生长速率下降,最大活菌数大幅度降低。试验三:松针精油通过改变菌体形态结构,膜脂肪酸含量和膜蛋白构象,使细胞膜受损,同时抑制苹果酸脱氢酶和DNA拓扑异构酶的活性,降低蛋白质表达量和DNA含量,从而抑制串珠镰刀菌和梭状芽孢杆菌的繁殖。结论:添加松针精油有助于改善苜蓿青贮的营养特性和发酵品质,提高有氧稳定性。体外抑菌试验表明,松针精油主要通过破坏菌体细胞膜,抑制菌体细胞的能量代谢、蛋白质表达以及DNA合成等方式抑制串珠镰刀菌和梭状芽孢杆菌的繁殖,而对嗜酸乳杆菌没有抑制作用。因此,松针精油可能是通过抑制串珠镰刀菌和梭状芽孢杆菌等有害微生物的繁殖,使乳酸菌迅速占据主导地位,进而改善苜蓿青贮饲料的品质。