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青葙子为植物青葙(Celosia argentea L.)的干燥成熟种子,其状扁圆形,黑色,可入药,于秋季采收。青葙子的药用记载始于《本草纲目》,具有清肝明目的功效,其作为治疗肝脏损伤,眼疾类的药物沿用至今,多个经典复方中均含有此药。因为青葙子外观性状普通,并无特殊之处,因而,市面上伪品众多,现行质量标准内容仅有显微,性状鉴别,杂质检查项等,缺少薄层鉴别及含量测定等关乎青葙子质量标准的重点核心内容。本文基于薄层色谱技术及高效液相色谱技术对于青葙子药材进行研究,以期提升青葙子质量标准,完善药典内容。1青葙子薄层色谱鉴别研究借助薄层色谱技术,本实验建立了青葙子药材的薄层鉴别方法,薄层色谱条件:展开剂为正丁醇-乙酸-水(4:1:1);显色剂为10%硫酸乙醇;室温。该方法首次采用青葙苷I、青葙苷J、青葙苷H作为专属指标性成分,使之在薄层板上被清晰地区别开来,同时能够使青葙子及其常见伪品得到有效鉴别。2青葙子药材的指纹图谱研究本实验采用电喷雾检测器(CAD)首次建立青葙子药材的HPLC-CAD指纹图谱方法,标定了16个共有峰,同时与伪品液相谱图加以比对,该方法能够有效鉴别青葙子及其常见伪品,相似度范围在0.281-0.998之间。液相梯度洗脱方法为:0-15min,25%-28%乙腈;15-19min,28%-26%乙腈;19-25min,26%-30%乙腈;25-35min,30%-40%乙腈;35-42min,40%-55%乙腈;42-50min,55%乙腈;50-52m in,55%-95%乙腈;52-62min,95%乙腈。仪器精密度,方法重复性、耐用性,样品稳定性均良好。3青葙子中青葙皂苷类成分的HPLC-CAD含量测定本实验采用电喷雾检测器(CAD),首次以具有保肝活性且专属性强、在药材内含量高的青葙苷I、青葙苷J、青葙苷H为专属指标性成分,建立HPLC-CAD高效液相含量测定方法。色谱条件为:以Waters CORTECS C18(4.6*150mm,2.7μm)为色谱柱;流动相:乙腈-0.3%冰醋酸水溶液;流速:1ml/min;柱温:30℃;CA D检测器雾化温度:50℃。梯度洗脱:0-15min,25%-28%乙腈;15-19min,28%-26%乙腈;19-25min,26%-30%乙腈。青葙苷I在0.01009mg/ml-0.2018mg/ml范围内呈线性关系,青葙苷J在0.000857mg/ml-0.1714mg/ml范围内呈线性关系,青葙苷H在0.005012mg/ml-0.2506mg/ml范围内呈线性关系。青葙苷I、J、H的检测限分别为:1ng、0.6ng、0.5ng.青葙苷I、J、H的定量限分别为4ng、2.6ng、3ng。仪器精密度,方法重复性、耐用性,样品稳定性均良好。4青葙子中青葙皂苷类成分的HPLC-ELSD含量测定本实验采用蒸发光散射检测器(ELSD)首次建立以青葙苷I、青葙苷J、青葙苷H为指标性成分的HPLC-ELSD含量测定方法。色谱条件为:以Waters CORT ECS C18(4.6*150mm,2.7μm)为色谱柱;流动相:乙腈-0.3%冰醋酸水溶液;流速:1ml/min;柱温:30℃;ELSD检测器参数蒸发温度:110℃;雾化温度:90℃。梯度洗脱:0-15min,25%-28%乙腈;15-19min,28%-26%乙腈;19-25min,26%-30%乙腈。青葙苷I在0.01009mg/ml-0.2018mg/ml范围内呈线性关系,青葙苷J在0.000857mg/ml-0.1714mg/ml范围内呈线性关系,青葙苷H在0.005012mg/ml-0.2506mg/ml范围内呈线性关系。青葙苷I、J、H的检测限分别为:0.0404μg、0.0857μg、0.0451μg。青葙苷I、J、H的定量限分别为0.0959μg、0.1714μg、0.1128μg。仪器精密度,方法重复性、耐用性,样品稳定性均良好。