论文部分内容阅读
目的比较肺癌胸膜转移所引起的恶性胸腔积液(Malignant Pleural Effusion,MPE)疾病中的NKT细胞的分布、其趋化因子受体CCRs的表型,及NKT细胞表面的颗粒霉素B(GranzymeB)、穿孔素(perforin)的表达。检测NKT细胞及相关趋化因子受体(CCRs)的分布、意义及NKT细胞在恶性胸腔积液中杀伤功能情况。方法四色流式细胞检测技术检测恶性胸腔积液、同源外周血(Peripheral Blood, PB)和健康对照组(Healthy Donor, HD)中TCR-Vα24+ TCR-Vβ11+的NKT细胞比例,及MPE、PB和HD的NKT细胞膜趋化因子受体CCR2,CCR4,CCR5和CCR6表达情况,和MPE、PB和HD中NKT细胞表达的颗粒霉素B(GranzymeB)及穿孔素(perfoin)情况。结果(1)恶性胸腔积液(MPE)NKT比例(0.98%±0.08%)高于外周血(PB) (0.71%±0.06%),(P=0.009);与健康对照组(HD)相比均无统计学差异,P>0.05。健康对照组血样标本的NKT比例(1.13%±0.09%)显著高于疾病组血样,P=0.001。(2)在MPE、PB及HD三组标本中,NKT表达CCRs比例分别为: CCR2 ( MPE 28.14%±8.41%、PB 34.44%±4.30%、HD 34.37%±3.54%),CCR4(MPE 40.52%±4.10%、PB 65.21%±4.83%、HD57.10%±5.28%),CCR5(MPE 32.36%±4.10%、PB 26.45%±5.10%、HD 14.31%±3.05%)及CCR6(MPE 19.37%±6.22%、PB 22.15%±7.21%、HD 17.29%±3.43%),其中各项CCRs比例作两两比较: CCR4在PB中显著高于MPE中,P<0.05;与HD无统计学差异。CCR5在MPE中显著高于PB中,P<0.05;与HD相比无统计学差异。CCR2和CCR6在三分标本中均无统计学差异, P>0.05。(2)NKT细胞表达的细胞毒性分子情况:GranzymeB( MPE2.96%±0.54%,PB5.43%±0.60%),PB显著高于MPE (P=0.008);perforin(MPE2.51%±0.45%,PB2.12%±0.32%),两者相比无统计学差异。在正常对照组中均未检测出NKT细胞表达GranzymeB和perforin。结论恶性胸腔积液中NKT细胞比例上调,高于同源外周血,但与正常对照组相比无明显上调。NKT细胞在恶性胸腔积液局部具有聚集,可能与其强大的抗肿瘤作用相关。恶性胸腔积液、同源外周血及健康对照组中的NKT细胞均表达一定比例的CCR2、CCR4、CCR5和CCR6分子,其中CCR4和CCR5的比例有所变化,提示CCR4和CCR5可能参与NKT细胞趋化活动。NKT细胞在恶性胸腔积液疾病患者刺激表达一定量的杀伤细胞因子,但在恶性胸腔积液微环境无明显增强,甚至GranzyemB在MPE中是下调的。这可能与晚期肿瘤患者免疫状况及MPE的免疫微环境相关。