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第一部分羟喜树碱对缺氧诱导的人HepG2肝癌细胞缺氧诱导因子1α及血管内皮生成因子表达的影响目的：探讨羟喜树碱(HCPT)对缺氧诱导的HepaG2肝癌细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的抑制作用。材料与方法：分别在常氧和缺氧状态下体外培养HepaG2细胞,以不同浓度的HCPT处理细胞16小时后,采用CCK-8比色试验法检测HCPT对HepG2细胞活力的影响,采用实时定量PCR检测细胞HIF-1α及VEGF mRNA的表达,采用Western blot检测两种蛋白的表达。结果：常氧与缺氧状态下HPCT对HepG2细胞的细胞毒性作用无显著性差异。缺氧诱导HIF-1α蛋白表达,但不影响其mRNA表达,HCPT明显抑制缺氧诱导的HIF-1α蛋白表达。相比之下,缺氧在mRNA及蛋白水平上调VEGF表达,HCPT可有效抑制VEGF mRNA及其蛋白的表达。尽管HCPT对HIF-1α及VEGF的抑制效应具有剂量依赖性,但无明显细胞毒效应的药物浓度即可达到有效的抑制作用。结论：HCPT对缺氧诱导的HepaG2细胞HIF-1α蛋白及VEGF mRNA、蛋白表达具有抑制作用,且该抑制作用与药物的细胞毒效应无关。第二部分兔VX2肝肿瘤介入栓塞后缺氧诱导因子1α的表达目的：探讨肝癌经导管动脉栓塞(TAE)后缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达。材料与方法：建立30只兔VX2肝癌模型,将其分为两组：TAE处理组(n=15),接受150-250μm聚乙稀醇(PVA)经导管肝动脉栓塞；对照组(n=15),接受蒸馏水经导管肝动脉注入模拟TAE。分别在实验处理后6小时、3天及7天,处死实验兔并在肿瘤和邻近正常肝组织取样,采用免疫组织化学方法检测HIF-1α蛋白表达,实时定量PCR检测HIF-1αmRNA表达。结果：HIF-1α蛋白在VX2肿瘤中有表达,而在邻近正常肝组织中无表达。HIF-1α阳性表达细胞主要分布于肿瘤坏死区周围。TAE处理组肿瘤HIF-1α蛋白水平明显高于对照组(P=0.002)。在3个处死时间点,6小时和3天处死的动物HIF-1α组间差异有统计学意义(分别为P=0.020,P=0.031)；而7天处死的动物HIF-1α组间差异无统计学差异(P=0.502)。HIF-1αmRNA在肿瘤和邻近正常肝实质均有表达,但两者的表达水平无统计学差异(P=0.372)。结论：肝癌TAE导致残存肿瘤HIF-1α蛋白表达增高,这可能是由于TAE诱导的肿瘤内缺氧所致。第三部分兔VX2肝肿瘤介入栓塞后缺氧诱导因子1α与血管生成的关系目的：探讨肝癌经导管动脉栓塞(TAE)后肿瘤缺氧诱导因子1α(HIF-1α)与血管生成的关系。材料与方法：建立20只兔VX2肝癌模型,将其分为两组：TAE处理组(n=10),接受150-250μm聚乙稀醇(PVA)经导管肝动脉栓塞；对照组(n=10),接受蒸馏水经导管肝动脉注入模拟TAE。处理后6小时、3天处死实验兔对肿瘤进行取样,采用免疫组织化学方法检测HIF-Ⅱ蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)表达及微血管密度(MVD),实时定量PCR检测VEGF mRNA表达。结果：TAE处理组肿瘤HIF-1α蛋白水平明显高于对照组(P=0.001)。HIF-1α阳性细胞主要分布于肿瘤坏死区周围。TAE处理组肿瘤VEGF蛋白、mRNA水平及平均MVD亦明显高于对照组(分别为P=0.001,0.000和0.001,)。HIF-1α蛋白水平与VEGF mRNA(r=0.612,P=0.004)、VEGF蛋白(r=0.554,P=0.011)及MVD(r=0.683,P=0.001)密切相关。结论：肝癌TAE通过上调残存肿瘤HIF-1α蛋白表达参与术后肿瘤血管生成的激活。HIF-1α可能成为抗血管生成治疗的新靶点与TAE联合用于肝癌治疗。第四部分羟喜树碱对兔VX2肝肿瘤介入栓塞后缺氧诱导因子1α及血管生成的抑制作用目的：探讨经导管动脉内灌注羟喜树碱(HCPT)对肝癌经导管动脉栓塞(TAE)后肿瘤缺氧诱导因子1α(HIF-1α)及血管生成的影响。材料与方法：建立30只兔VX2肝癌模型,将其分为三组：第一组(对照组,n=10),接受经导管肝动脉灌注蒸馏水模拟TAE；第二组(TAE组,n=10),接受150-250μm聚乙稀醇(PVA)经导管肝动脉栓塞；第三组(TAE+HCPT组,n=10),接受经导管肝动脉灌注HCPT(1 mg／kg),随后PVA栓塞。处理后6小时、3天处死实验兔对肿瘤进行取样,采用免疫组织化学方法检测HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达及微血管密度(MVD)结果：第二组肿瘤HIF-1α、VEGF及MVD显著高于第一组和第三组(P<0.05),而第一组与第三组之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。HIF-1α蛋白水平与VEGF蛋白(r=0.587,P=0.001)及MVD(r=0.527,P=0.003)密切相关。结论：经导管动脉内灌注HCPT可以抑制肝癌TAE后HIF-1α表达及血管生成。