黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.)是近年来新发掘的野生资源,富含花色苷等多酚类功效成分。我国西北地区的新疆、青海、宁夏、甘肃等省区是黑果枸杞的主要分布区域,这些分布区域生态条件差异很大。但目前关于不同生态环境条件和不同基因型的黑果枸杞花色苷等多酚的研究报道鲜见,关于黑果枸杞花色苷等多酚各化学组分与活性的相关性尚不明确。本研究以枸杞不同组织、常见富含花色苷果蔬为对比,较为系统地探讨了黑果枸杞主要化学成分及体外抗氧化活性,包括对血管内皮细胞氧化损伤的保护效果；利用高效液相色谱(HPLC)、高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)、制备色谱、质谱(MS)等手段,分离、鉴定花色苷等多酚化合物；分析比较了黑果枸杞花色苷与其它常见果蔬花色苷的组成和对血管内皮细胞氧化损伤的保护效果的差异性；采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版,建立不同产地来源、不同种质材料黑果枸杞多酚HPLC化学指纹图谱,采用中药材指纹图谱相似度评价系统(2004A)、系统聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)解析所建指纹图谱,探讨产地、种质材料对黑果枸杞多酚类物质组成、含量的影响；通过体外构建5种抗氧化模型观察黑果枸杞多酚提取物的抗氧化活性的差异性,采用HCA、PLSR法等分析方法,分析黑果枸杞多酚体外抗氧化“谱-效”关系,探讨其各化学组分与活性的相关性。为黑果构杞优质品种的选育、栽培、质量评价等积累科学数据和资料。主要研究结果如下：1黑果枸杞主要化学成分及体外抗氧化活性研究以枸杞、枸杞花、叶、枸杞花粉为参照,系统地测定分析了同一产地(宁夏银川园林场)黑果枸杞的主要化学成分及体外抗氧化活性。结果表明,营养成分丰富、体外抗氧化活性较强,具备开发利用的价值。每100 g黑果干果中,含有总糖、总蛋白、总脂肪、总氨基酸及Vc、VE分别为42.64 g、11.26g、5.10 g、196.12 mg、2.13 mg。黑果枸杞的总多不饱和脂肪酸和总单不饱和酸占到了总脂肪的63.52%和16.69%。与枸杞及其其它组织比较,黑果枸杞富含有矿物元素Fe(405mg/kg)、花色苷类(2.97 g/100 g)多酚类物质：黑果枸杞酸性乙醇提取物具有较强的体外抗氧化活性,且总花色苷含量、总多酚含量与抗氧化活性均呈正相关性,总酚含量与抗氧化活性的相关性大于总花色苷含量的相关性。2黑果枸杞与常见果蔬的花色苷类多酚的组成及对血管内皮细胞氧化损伤的保护效果功效比较研究采用HPLC等分析方法、初步比较并评价了黑果枸杞等6种不同花色苷来源植物材料的花色苷组成、含量及体外抗氧化活性,结果表明：较5种花色苷含量较高的天然果蔬材料,黑果枸杞总花色苷含量最高,分别是是葡萄、树莓、紫甘蓝、蓝莓和紫薯的10.72、4.91、1.91、1.75、4.45倍：从几种不同的果蔬花色苷HPLC指纹图谱可知,黑果枸杞中花色苷主要组分与所测其它果蔬的花色苷主要组分保留时间不同,峰面积差异很大,即其花色苷组分种类和含量都有别于其它果蔬花色苷构成；体外细胞氧化损伤保护试验结果表明,黑果枸杞花色苷提取物血管内皮细胞氧化损伤保护功效显著高于其它受试果蔬花色苷,表明其具有很好的抗氧化活性,可作为较好的开发功能性食品的资源。3黑果枸杞多酚的分离纯化及结构分析通过HPLC-ESI-MS分析,从黑果枸杞中分离鉴定出13个多酚类化合物。其中7个为酰化类花色苷,6个为非花色苷类化合物。其中,一个花色苷、4个柚皮素衍生物和2个5,7-二羟基黄酮衍生物为首次从黑果枸杞中被鉴定。矮牵牛素-3-O-芸香糖(顺式-p-香豆酰)-5-O-葡萄糖苷为黑果枸杞的主要花色苷。以富含花色苷的黑果枸杞为原料,选用大孔树脂XAD-8、SephadexLH-20分离纯化得到的纯度为HPLC级89.66%。由半制备高效液相色谱,对其再次进行纯化得到黑果枸杞花色苷主要组分的一个单体。该单体经ESI-MS分析,结果表明主要分离组分的MS数据分别与HPLC-MS分析的矮牵牛素-3-O-芸香糖(顺式-p-香豆酰)-5-O-葡萄糖苷的MS数据一致。4不同产地黑果枸杞多酚HPLC指纹图谱研究建立了26份不同产地的黑果枸杞材料的多酚HPLC指纹图谱,对所建图谱进行了分析,得到如下结果：1)所测黑果构杞样本中均含有大量的酚类物质,其含量在不同产地的材料间存在显著差异,其中青海格尔木乌图美仁、新疆甘河子、新疆巴仑台镇、宁夏贺兰12-01等产地的黑果枸杞总酚、总黄酮及总花色苷含量较高；2)在所有供试黑果枸杞不同产地的材料中共检测到12种共有酚类化合物,其中,飞燕草素-3-O-芸香糖苷(顺式-p-香豆酰)-5-O-葡萄糖苷在所有供试黑果枸杞材料中的多酚及花色苷的主要成分；3)采用药典委员会推荐的指纹图谱相似度评价系统分析,各产地黑果枸杞多酚HPLC特征图谱很相似,多数质量均较好,有个别质量较差的情况存在；4)采用HCA法,根据不同多酚指标,可将这26份黑果枸杞资源大体均分为7类,聚类参数不同,聚类结果略有差异,即不同来源的野生黑果拘杞在多酚组成上有一定差异；5)采用PCA分析图谱结果表明,5,7-二羟基黄酮-衍生物类化合物、柚皮素、飞燕草素-3-O-芸香糖苷(顺式-p-香豆酰)-5-O-葡萄糖苷、矮牵牛素-3-O-芸香糖(顺式-p-香豆酰)-5-O-葡萄糖苷几个化合物可能是决定黑果枸杞不同产地来源的材料之间多酚含量质量差异的主要化合物指标。5黑果枸杞不同种质材料多酚HPLC指纹图谱研究建立了17份黑果枸杞种质材料的多酚]HPLC指纹图谱,对所建图谱进行了分析,得到如下结果：1)这些黑果枸杞资源中含有大量的酚类物质,其含量在不同种质材料间存在显著差异,其中材料编号为9、10、11号的黑果枸杞总酚、总黄酮及总花色苷含量较高。2)在所有供试黑果枸杞种质材料中共检到8种共有酚类化合物,其中矮牵牛素-3-O-芸香糖(顺式-p-香豆酰)-5-O-葡萄糖苷在所有供试黑果枸杞资源材料中的含量均最高。是黑果枸杞多酚及花色苷的主要成分；3)采用药典委员会推荐的指纹图谱相似度评价系统分析,17份材料相似度介于0.325-1之间,组成差异较大：4)根据不同多酚指标,可将这17份黑果枸杞资源大体均分为6类,聚类参数不同,聚类结果略有差异；5)采用PCA分析图谱表明,5,7-二羟基黄酮-衍生物类化合物、柚皮素、矮牵牛素-3-O-芸香糖(顺式-p-香豆酰)-5-O-葡萄糖苷及几个未知化合物可能是决定黑果枸杞不同种质材料之间多酚含量质量差异的主要指标。6黑果枸杞多酚体外抗氧化谱效关系研究采用FRAP值、·OH清除力、DPPH自由基清除力、还原力和总抗氧化能力(TEAC)5个体外抗氧化指标对黑果枸杞26个不同产地的黑果枸杞多酚进行抗氧化活性评价。结果表明,产地间样本抗氧化活性差异较大。抗氧化模型不同,其抗氧化活性存在差异。综合分析,宁夏贺兰12-01、青海德令哈、新疆巴轮台镇、新疆高泉、甘肃民勤中渠等产地的活性较高；采用PLSR将各抗氧化指标与黑果枸杞多酚的关系进行相关性分析,结果表明,多酚含量对抗氧化活性的影响最大,其后依次是其主要成分矮牵牛素-3-O-芸香糖(顺式-p-香豆酰)-5-O-葡萄糖苷含量、总花色苷含量、总黄酮含量,权重系数分别为2.243、1.418、1.392和1.298。各抗氧化指标与峰31和峰10两个化合物呈负相关(这两个化合物分别经HPLC-MS初步鉴定为柚皮素-3-O-芸香糖-7-O-己糖苷、飞燕草素-3-O-芸香糖(反式-p-香豆酰)-5-O-葡萄糖苷),与其它各多酚包括各化合物指标呈正相关。