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目的:1.分析ZNF831基因在临床肺腺癌患者中的表达情况及其与临床病理资料、生存预后之间的关系。2.探讨ZNF831基因在化学致癌物诱导肺腺癌发生过程中的表达变化及其在不同肺腺癌细胞株中的表达情况。3.初步探索ZNF831基因在肺腺癌发生发展过程中的主要生物学功能及作用机制。方法:1.基于TCGA数据库收集的数据,分析ZNF831基因在肺腺癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织的表达情况及其与患者临床病理特征和生存时间之间的关系,并利用K-M Plotter数据库进行生存预后验证。2.采用qRT-PCR和RT-PCR检测ZNF831基因在化学致癌物3-甲基胆蒽(3-methylcholanthrene,3-MCA)诱导的HBE细胞恶性转化过程中及其在不同肺腺癌(Lung adenocarcinoma,LUAD)细胞株中的表达。采用qRT-PCR分析去甲基化药物5-Aza-dC处理细胞前后ZNF831基因的表达情况。3.在不同LUAD细胞中建立ZNF831基因过表达和敲低表达模型,并通过差异表达的细胞模型分析ZNF831基因在LUAD发生过程中的作用。采用CCK-8、平板克隆实验检测细胞的增殖、生长;采用流式细胞仪检测细胞的周期、凋亡;采用划痕愈合实验和Transwell实验分析细胞的迁移、侵袭能力。4.利用裸鼠皮下成瘤实验和尾静脉注射实验分析ZNF831基因在体内对肿瘤生长、侵袭、迁移的影响。5.采用qRT-PCR和Western Blot检测ZNF831基因在LUAD中调控的下游分子的mRNA和蛋白表达水平,明确ZNF831基因在LUAD中发挥作用的主要信号通路。结果:1.TCGA数据库中,与癌旁正常组织相比,LUAD患者肿瘤组织中ZNF831的表达量显著降低(P<0.05)。ZNF831基因的表达与T分期、肿瘤分期高度相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示,肺腺癌患者中,ZNF831基因高表达患者生存时间显著高于低表达患者的生存时间(P<0.05)。单因素及多因素COX回归分析表明ZNF831表达量是肺腺癌患者的独立保护因素(P<0.05)。2.随着3-MCA诱导的HBE恶性转化细胞代数的增加,ZNF831基因的表达水平呈逐步下调趋势(P<0.01)。3.ZNF831基因在不同LUAD细胞株中的表达不同。与HBE细胞株相比,该基因仅在A549细胞株中高表达,在SPC-A-1、LTEP-a-2、NCI-H1650等大多数肺腺癌细胞株中均低表达。去甲基化药物5-Aza-dC处理细胞后ZNF831基因表达显著上调(P<0.01)。4.ZNF831基因过表达后促进SPC-A-1、LTEP-a-2细胞的凋亡,抑制细胞的增殖、克隆形成、侵袭和迁移,并阻滞细胞在G1期(P<0.01)。5.干扰A549细胞中ZNF831的表达后,细胞的增殖、克隆形成能力以及侵袭和迁移能力显著增强(P<0.01)。6.裸鼠皮下成瘤和尾静脉注射实验中,干扰ZNF831基因后明显促进了肿瘤的生长、侵袭和迁移。7.ZNF831基因在LUAD中发挥抑癌作用主要与ZNF831基因过表达后可抑制Wnt/β-catenin信号通路,下调CTNNB1(β-catenin)及其下游分子MMP2、MMP7、C-MYC的mRNA和蛋白表达有关。而干扰ZNF831基因表达后则可以促进CTNNB1及MMP2、MMP7、C-MYC的mRNA和蛋白表达。Wnt/β-catenin信号通路抑制剂处理可显著减低ZNF831在肺腺癌中的作用。结论:1.ZNF831基因在LUAD中低表达,其表达水平与LUAD患者的生存预后呈正相关;ZNF831表达量是肺腺癌患者的独立保护因素。2.ZNF831基因在3-MCA诱导HBE细胞恶性转化过程及肺癌细胞中表达逐渐下调,ZNF831基因表达受DNA甲基化调控。3.ZNF831基因抑制LUAD细胞的增殖、侵袭和迁移,并使细胞的G1期阻滞。4.ZNF831基因在LUAD中发挥抑癌作用主要与调控Wnt/β-catenin信号通路及下游关键分子有关。