肿瘤转移抑制蛋白MTSS1(Metastasis suppressor 1;又名Missing in Metastasis,MIM),作为肌动蛋白结合蛋白,在细胞形态、细胞运动、神经发育与肿瘤转移中起重要作用。我们前期工作显示,在原代培养小脑粒细胞神经元中的MTSS1过量表达能显著增加树突的数量、分支和总长度,但明显抑制轴突的长度。为了反证这一结果,本论文中利用RNA干扰技术,首先对粒细胞神经元中的MTSS1进行knock down,发现与对照组相比,粒细胞神经元中轴突的长度明显增加,但树突的总长度缩短,伴随着树突数目的减少,从而验证MTSS1过表达试验的结果。同时,为了进一步探讨MTSS1对树突分支的影响,我们在二级树突乃至高级树突较多的原代培养海马神经元上进行knock down试验,与预期结果一致的是,与对照相比,海马神经元树突的总长度缩短,一级与二级树突的数目分别减少,暗示MTSS1不仅影响树突的数目与总长度,同时影响树突的分支。这些结果与以前的过量表达的结果相互印证,有效显示MTSS1在神经元形态发生中的作用。同时,前期工作也显示永久抑制型小GTPase Rac1与MTSS1共转染可以回复MTSS1对粒细胞神经元的部分影响,暗示Rac1通路可能参与MTSS1对神经元形态的影响。本论文中,我们采用永久活化型Rac1与MTSS1共转染,结果显示,活化型Rac不能抑制MTSS1的作用。同时,我们发现MTSS1过量表达可以增加神经元细胞系Neuro2a中Rac1活性。这些结果进一步证实Rac1的活化对MTSS1诱导的神经元形态变化很重要。除对神经元形态的影响之外,MTSS1也影响胞间连接的形成。前期工作中显示,MTSS1与α-ACTN4存在相互作用,且MTSS1的过量表达促进α-ACTN4向细胞前沿或胞间连接聚集,并伴随肌动蛋白纤维染色信号的增强。为了为了反证这一结果,我们采用knock down技术,抑制MTSS1在上皮细胞中的内源表达并同时过表达α-ACTN4,结果显示,α-ACTN4在胞间连接处的分布明显减少,上皮细胞会丧失部分面的胞间连接,转而形成细胞迁移相关的类片状伪足的形态。总之,本论文中利用MTSS1 knock down技术,充分反证了前期过表达的结果,即MTSS1促进神经元树突数目、长度并抑制轴突伸长,以及MTSS1可以促进α-ACTN4向细胞周边迁移,从而促进胞间连接处肌动蛋白纤维的聚集。