85KDa的胞质磷脂酶A2(cPLA2)在许多与炎症反应相关的细胞中表达,它能够使膜脂的sn-2位点选择性释放花生四烯酸,从而引发炎症反应.许多种介质均可激活cPLA2.另外,cPLA2也在肾脏,脾脏,心脏,肝,肺,海马等器官中表达,这表明cPLA2除了参与炎症反应外,还参与许多信号通路,如血小板的活化,TNF诱导的细胞毒效应和细胞的增殖.因此cPLA2被作为抗炎药物的重要靶点加以研究.该文报道了带有His-tag的人胞浆磷脂酶A2的C2结构域的高效表达,并用内源荧光的变化测定了其稳定性和其与钙离子结合的结合常数.结果表明带有His-tag的C2结构域仍可有效用于研究其折叠及其与钙离子的协同性结合,温度从22℃升高到35℃时,C2结构域和钙离子结合的协同性程度显著增强.在该文中运用了多种光谱方法如CD,荧光光谱,时间分辨荧光光谱等,对apo-和holo-cPLA2 C2 domain的结构特征进行了比较.实验结果表明Calcium的结合不仅导致C2 domain局部构象改变,而且也导致cPLA<,2> C2 domain的二级和三级结构发生改变.Calcium ion结合导致的C2 domain的构象变化可能对于cPLA2酶的激活及酶活力的调节起到重要作用.PKCs是一个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族,在细胞增殖活化过程中参与大量的信号转导通路.PKCs家族中的所有成员均包含有一N端调节结构域和一C端催化结构域.根据其调节结构域结构的不同,PKCs被分为以下三类:传统PKC(α,βⅠ,βⅡ,γ),稀有PKC(δ,ε,η,θ),和非典型PKC(ζ,ι).传统PKC的调节结构域由两个保守膜靶定分子构成:C1和C2结构域.PKC C2结构域与膜脂的结合不仅具Calcium依赖性,还具膜脂PS依赖性.在对于PKC C2结构域进行X-射线衍射结构分析后发现虽然PKC C2结构域和cPLA2 C2结构域同属一免疫球蛋白超家族,序列同源性较高,但其二级结构却有明显不同.在实验中发现无论是对于脲的稳定性还是内源荧光淬灭性质,两者都有明显的差别,在实验上初步验证了两者在晶体结构上的差别.