高氧暴露新生早产大鼠肺组织中长链非编码RNA MALAT1和Nrf2的表达变化及其意义

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目的观察高氧暴露下新生早产大鼠肺组织中的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(metastasis-associated lung denocarcinoma transcript 1,MALAT1)和转录因子NF-E2相关因子2(nuclear factor-erythroid2-related factor 2,Nrf2)的动态表达,探讨长链非编码RNA MALAT1和Nrf2的表达变化在高氧肺损伤中的作用和相关性。方法孕21天Sprague-Dawley(SD)大鼠行剖腹产,80只早产鼠喂养24h后采用随机分组法分为空气组和高氧组,每组40只。空气组早产鼠置于室内常压空气中饲养(氧浓度21%),高氧组早产鼠置于同一室内常压氧箱(保持氧浓度>85%)中饲养,两组新生早产鼠分别于空气或高浓度氧暴露后第1、4、7、10、14天测量体重及身长,处死后收集肺组织标本。采用石蜡切片苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察新生早产大鼠肺组织的病理变化;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测lncRNA MALAT1和Nrf2 mRNA水平的表达变化。结果(1)与空气组相比,高氧组新生早产大鼠体重在第1、4天增长量均减少,两组间比较差异无统计学意义(P>0.05),在第7、10、14天体重增长量均显著减少(P<0.05);高氧组和空气组新生早产大鼠身长增长的趋势一致,两组间身长无明显差异(P>0.05)。(2)与空气组相比,高氧组新生早产大鼠肺组织失去正常规则形态,结构紊乱,肺泡间隔变薄,肺泡腔增大,肺泡数目减少。(3)与空气组相比,高氧组新生早产大鼠肺组织肺泡化程度降低,辐射状肺泡计数(radiate alveolar counts,RAC)在第1天出现减少,但两组相比差异无统计学意义(P>0.05),第4、7、10、14天均显著减少(P<0.05)。从变化趋势上,空气组早产大鼠RAC随处理时间延长逐渐增加,而高氧组早产大鼠RAC在第1天后逐渐增加,7天时达到最大值,第10天开始减少,第14天降到最低。(4)空气组新生早产鼠肺组织中MALAT1基因表达在1至14天内呈现显著差异性表达变化(P<0.05),第1天后出现下降,第7天时达到最低值,第10天开始表达增强。与空气组相比,高氧组新生早产大鼠肺组织中MALAT1基因表达在第1天时显著减弱(P<0.05),第4、7天时均明显增强(P<0.05),第10天开始出现显著减弱(P<0.05),第14天时下降到最低,但在第14天两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(5)与空气组相比,高氧组新生早产大鼠肺组织中Nrf2 mRNA的表达在第1天显著减弱(P<0.05),第4、7、10天时均显著增强(P<0.05),第14天时表达减弱,但在第14天时两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(6)高氧暴露状况下,新生早产大鼠1到14天内lncRNA MALAT1的表达和肺泡发育指标辐射状肺泡数(RAC)存在显著相关性(r=0.382,p=0.015);lncRNA MALAT1表达和Nrf2 mRNA表达存在显著相关性(r=0.360,p=0.001)。结论(1)lncRNA MALAT1可能参与正常大鼠肺发育过程。(2)肺组织损伤程度随高氧暴露时间延长逐渐加重,且lncRNA MALAT1水平与肺损伤程度及Nrf2水平相关,提示lncRNA MALAT1可能通过Nrf2相关信号通路参与新生早产大鼠高氧肺损伤的发病过程。
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