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MAGEA1基因(Melenoma-associated antigen1,黑色素肿瘤相关抗原1)是1991年由Vander Bruggeon等人从一例患有黑色素肿瘤但是临床表现良好的病人身上所分离得到的。MAGEA1基因所编码的蛋白能够被人体毒性T淋巴细胞克隆(CTL克隆)识别。 MAGEA1基因通常在恶性肿瘤细胞中不表达,其原因是该基因的启动予处CpG岛的甲基化。MAGEA1基因所编码的蛋白可以与SKIP蛋白发生相互作用并且通过招募组蛋白去乙酰酶(HDAC-1),从而调控某些特定基因的转录。已有研究结果表明MAGEA1基因可能与肿瘤发生相关。但到目前为止,还没有证据表明MAGEA1基因是与肿瘤细胞的迁移相关的,更不用说它是如何影响肿瘤细胞迁移的。 我们实验室利用Micro-array技术,发现稳定高表达OGR1的MCF-7细胞系(OGR1-MCF-7)相对稳定高表达GPR4的MCF-7细胞系(GPR4-MCF-7)和稳定高表达PHM6的MCF-7细胞系(PHM6-MCF-7),MAGEA1基因都有很明显的上调,并且在诸多由于OGR1高表达而上调的基因巾居于第一位。由于OGR1基因被认为在体外以及体内均可以抑制肿瘤细胞的迁移,那么有理由相信MAGEA1基因也应该参与到了肿瘤细胞的迁移过程中,并且发挥着重要的作用。 本文首先通过RT-PCR证明:在MCF-7细胞系中,不管是OGR1稳定高表达还是瞬时高表达,均可以引起MAGEA1基因的上调(即MAGEA1基因的上调确实是以依赖OGR1的方式进行的)。我们还发现,在乳腺癌MCF-7细胞系中高表达OGR1后,细胞中3种重要的DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3A、DDNMT3B均有显著的下调。由此我们推测:由于OGR1高表达,导致DNA甲基转移酶表达的下调,从而引起基因组甲基化水平的降低,最终导致MAGEA1基因的表达。 另外一方面,为了探究MAGEA1基因对于肿瘤细胞迁移能力的影响,我们采用乳腺癌细胞系MCF-7为研究对象,将高表达MAGEA1的质粒HA-PHM6-MAGEA1瞬时转染MCF-7细胞系,通过Transwell Assay以及Wound Healing Assay发现:MAGEA1基因的高表达可以抑制乳腺癌细胞系MCF-7的迁移能力。随后,通过RT-PCR我们又发现两株迁移能力差别很大的卵巢癌细胞系中MAGEA1基因的表达也有着极其显著的差别:即迁移能力弱的卵巢癌SKOV3细胞中的MAGEA1基因表达高;迁移能力强的卵巢癌SKOV3.ip1细胞中的MAGEA1基因表达低。由此,我们分别通过在SKOV3细胞系中干扰MAGEA1基因的表达、在SKOV3.ip1细胞中使MAGEA1基因瞬时高表达,通过TranswellAssay表明:MAGEA1基因的高表达可以抑制SKOV3.ip1细胞系的迁移能力;干扰MAGEA1基因的表达却能够明显促进SKOV3细胞系的迁移能力。此外,我们又在乳腺癌MCF-7细胞系中瞬时转染OGR1质粒以及MAGEA1干扰质粒,通过Transwell Assay表明,当MAGEA1基因的表达受到干扰后,OGR1基因抑制MCF-7细胞系的迁移能力能够得到一定程度的回补。 根据我们的研究结果可以推测:MAGEA1基因是一个潜在的肿瘤抑制基因,在肿瘤细胞的转移过程中发挥着极其重要的作用。