姬松茸酚类物质的提取及其功能学的研究

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姬松茸(Agaricus Blazei Murrill)属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、蘑菇科、蘑菇属,是一种珍稀的食药兼用菌。姬松茸具有丰富的营养价值以及特殊的药用保健功效。本项目研究了姬松茸酚类物质的提取工艺,研究姬松茸酚类物质的抗氧化能力及其抑菌活性;并且通过高效液相法对姬松茸酚类物质有效成分进行化学成分分析。研究成果为开发利用姬松茸酚类物质提供了理论依据。(1)以姬松茸干品为原料,研究溶剂提取姬松茸酚的最佳工艺。分别以水和乙醇为提取溶剂,考虑不同因素对提取效率的影响,如溶剂浓度、浸提温度、料液比、浸提时间和浸提次数等;并在单因素实验的基础上进行正交实验,对提取工艺进行了优化。试验结果表明,水提法提取姬松茸酚类物质的最佳工艺参数为:以1:30的料液比,在90℃水浴中浸提3次,每次处理3小时,姬松茸酚提取率为1.584%;醇提法提取姬松茸酚类物质的最佳工艺参数为:80%的乙醇—水混合溶液以1:25的料液比,在60℃水浴中浸提3次,每次处理2小时,姬松茸酚提取率为2.138%。乙醇法提取率较水提法提取率高出35%。组织定位实验结果表明,姬松茸菌伞部位酚含量较菌柄部位酚含量高出36%。此外,研究了超声波强化提取对姬松茸酚提取率的影响以及微波在姬松茸酚提取中的应用,结果显示超声波能够提高姬松茸酚的水提取得率。(2)采用超临界CO2流体萃取技术,研究超临界萃取姬松茸酚的最佳工艺。对影响超临界CO2萃取酚类物质的各种因素进行了单因素试验研究,并优选指标进行正交试验研究,得到较适宜的萃取工艺条件为:夹带剂为60%乙醇,萃取温度75℃、萃取压力40MPa、CO2流量为20L/h、夹带剂用量120mL。然后再进行了动态萃取与静态萃取的比较,得出先静态萃取1h后再动态萃取1h,萃取率最高,酚类物质的得率达2.431%。超临界流体CO2萃取较优化后的乙醇浸提法姬松茸酚得率高出14%,且夹带剂用量少,萃取时间短,萃取效率高。(3)以茶多酚为对照,采用Fenton反应研究姬松茸酚对·OH的清除作用;采用邻苯三酚自氧化法研究姬松茸酚对·O2-的清除作用。结果显示:在试验浓度范围内,姬松茸酚对·OH自由基和·O2-自由基具有一定的清除能力;在浓度相同的情况下,姬松茸酚对·O2-自由基的清除能力比对照组茶多酚强,但对·OH的清除能力却比茶多酚弱。同时,对姬松茸酚抗油脂自动氧化的能力进行初步研究,结果显示,姬松茸酚具有一定的抗油脂氧化活性。(4)以茶多酚为对照,研究了姬松茸酚的抑菌作用。结果表明:姬松茸酚对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌三种菌种均有抑制作用,但对试验用的绿木霉和黑霉两种真菌抑制作用不明显。在一定温度内处理不影响姬松茸酚的抑菌活性。姬松茸酚对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为6mg/mL,对大肠杆菌的最低抑菌浓度为3mg/mL,对枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度为4mg/mL。(5)利用高效液相法对姬松茸酚有效成分进行化学成分分析,在色谱条件为柱温30℃;反相C18柱;运行130min;流速1mL/min;检测波长260nm下,进行甲醇—水变梯度洗脱;可较好地分析姬松茸酚类物质中的各成分,并从中分离出绿原酸。
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