【摘 要】
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本试验选用吉林德大养鸡场一日龄肉仔鸡60只进行饲养,肉仔鸡随机分成3组,每组20只,分别作为空白组、空白添加组,供试组取样材料。饲养7周后分别取不同的组织进行不同处理后检测。
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本试验选用吉林德大养鸡场一日龄肉仔鸡60只进行饲养,肉仔鸡随机分成3组,每组20只,分别作为空白组、空白添加组,供试组取样材料。饲养7周后分别取不同的组织进行不同处理后检测。 本研究采用柱前衍生化方法、紫外检测器的高效液相色谱法(HPLC)检测鸡组织中链霉素的残留量,优化了样品的前处理方法和高效液相色谱条件(包括流动相的组成和流速),同时优化了前处理过程中洗脱液和提取液的用量。试验方法的建立主要包括衍生化试剂的选择、衍生化条件和检测波长的确定、衍生化产物稳定性的研究、色谱条件的建立、标准曲线的制备和加标回收试验。色谱条件的建立包括对流动相的组成、比例、流速、缓冲液PH值、柱温和进样量的确定。 结果表明:(1)通过试验确定了1,2-萘醌4-磺酸钠和氢氧化钠为最佳衍生化试剂,在45℃条件下反应10min衍生化完全,并且在252nm波长处有特征性的最大吸收,衍生化产物在5h内相对稳定。(2)色谱条件通过对各项参数的筛选,表明:流动相为V(乙腈):V(醋酸盐缓冲液pH=3.3):V(水)=10:10:80,流速0.3mL/min,缓冲液PH值为3.3,柱温35℃,检测波长252nm,进样量20μl为最佳检测条件。(3)前处理条件的筛选主要针对沉淀剂和洗脱液用量不同,筛选最佳用量。结果表明:采用沉淀剂(5%5ml三氯醋酸)沉淀蛋白质,洗脱剂(10mL甲醇)洗脱,3种不同组织添加不同浓度标准溶液时测定回收率为添加200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL浓度时平均回收率分别为75%~90%,70%~86%,64%~75%,变异系数均≤10%。(4)同一试样设10个平行样进行检测,计算其变异系数为5.72%,说明该方法的重现性较好。(5)通过添加不同浓度的标准溶液检测出最低检测限为肌肉120.00μg/kg,肝脏123.00μg/kg,肾脏218.00μg/kg。该指标符合兽药残留检测方法的要求。
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