目的:大蒜的功效成分是蒜氨酸及经蒜酶催化裂解产生的大蒜辣素等含硫化合物。新疆大蒜以含量高蒜氨酸而闻名,可作为制药原料。本课题组已从大蒜中分别提取相对稳定的蒜氨酸和蒜酶,并达到中试生产水平,正以蒜氨酸和蒜酶为原料,研制“高效大蒜新制剂”。但前期中试生产蒜氨酸原料含量小于90%,达不到国家一类新药申报的要求,本研究在现有工艺基础上进一步优化重结晶工艺,期望得到稳定的蒜氨酸重结晶工艺。活性成分大蒜辣素不稳定,在药效学实验中,需要在临用前制备,制备方法的一致性和可操作性直接决定了药效学的结果准确性,本研究首先需要规范蒜酶活性测定条件和方法、研究蒜氨酸/蒜酶的配比,然后确定以高含量蒜氨酸(90%)制备大蒜辣素的工艺,并在此基础上考察其稳定性,为能否制备大蒜辣素对照品提供依据。方法:1.综合考虑蒜氨酸的含量和收率两个因素,确定蒜氨酸(90%)重结晶工艺中溶解方法和结晶温度,通过放大至中试水平,得到重结晶方法中蒜氨酸浓度、乙醇浓度及终产品蒜氨酸含量之间的关系。2.采用HPLC法以蒜氨酸减少量计算蒜酶活力,考察不同含量底物蒜氨酸及催化温度对蒜酶活力测定结果的影响。3.分别以50%和90%的蒜氨酸为原料以蒜氨酸和大蒜辣素转化率为指标,考察制备大蒜辣素时蒜氨酸/蒜酶的配比,确定制备大蒜辣素的条件。采用超滤法除去大分子酶,制备大蒜辣素水溶液,以HPLC法测定大蒜辣素的含量及稳定性。结果:确定了蒜氨酸重结晶的工艺,原料先按料液比1:3用水溶解,再按料液比1:6加一定量的乙醇,在60℃的水浴中降温结晶,用70%乙醇洗涤结晶。确定了蒜氨酸浓度在45～120mg/ml,乙醇浓度在55～75%之间得到的蒜氨酸含量达到90%;确定以95%的蒜氨酸为底物,催化温度为35℃为蒜酶活力测定的最佳方法。50%的蒜氨酸与蒜酶的配比达到1mg:17.0U时,蒜氨酸和大蒜辣素的转化率分别为76%和65%,90%的蒜氨酸与蒜酶的配比达到1mg:17.0U时,蒜氨酸和大蒜辣素的转化率分别为95%和100%。采用超滤离心管,低温离心1h,离心溶液储存在-20℃下,5天内是稳定的。采用超滤杯,制备大蒜辣素水溶液在低温下可储存20天。结论:本文确立了蒜氨酸单体的重结晶中试工艺。蒜酶活力测定条件的优化,蒜氨酸/蒜酶反应配比及大蒜辣素制备的研究,为制成大蒜药品提供可靠的依据和重要的基础。