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第一部分哮喘小鼠气道粘液分泌的改变
目的:观察哮喘小鼠气道粘液分泌与气道炎症的改变。
方法:清洁级BALB/c小鼠18只随机分为2组:对照组和哮喘组各9只。测定支气管肺泡灌沈液(BALF)炎症细胞总数和细胞分类计数,采用ELISA检测BALF中的IL-4和肿瘤坏死因子-a(TNF-a)水平,用阿利辛蓝-过碘酸雪夫氏(AB-PAS)染色气道杯状细胞以及用免疫组织化学检测肺组织中粘蛋白5ac(Muc5ac)的表达。
结论:哮喘小鼠出现以嗜酸性粒细胞和淋巴细胞为主的气道慢性炎症,并出现气道粘液高分泌改变,且与气道炎症关系密切。
第二部分TGF-β1在哮喘肺组织中的表达
目的:观察转化生长因子-β1(TGF-β1)在哮喘小鼠肺组织的表达情况。
方法:清洁级BALB/c小鼠18只随机分为2组:对照组和哮喘组各9只。测定BALF炎症细胞总数和细胞分类计数,IL-4和TNF-a含量,用AB-PAS染色气道杯状细胞以及用免疫组织化学检测气道中Muc5ac和肺组织TGF-β1蛋白的表达。
结论:TGF-β1在哮喘小鼠肺组织中的表达明显增加,其变化与气道Muc5ac蛋白表达密切相关。
第三部分TGF-β1在哮喘小鼠气道粘液高分泌中的作用及吡非尼酮干预的影响
目的:通过吡非尼酮干预TGF-β1表达,探讨TGF-β1在哮喘气道粘液高分泌的作用。
方法:BALB/c小鼠45只随机分为5组:对照组、哮喘组、强的松组,吡非尼酮组及吡非尼酮自身对照组,每组9只。测定BALF中炎症细胞总数和细胞分类计数,IL-4和TNF-a含量,用AB-PAS对气道杯状细胞进行染色以及用免疫组织化学法检测气道Muc5ac和肺组织TGF-β1蛋白的表达。
结论:吡非尼酮能有效抑制肺组织TGF-β1表达而降低气道粘液高分泌,提示TGF-β1在哮喘气道粘液高分泌中起重要作用。