研究背景和目的食管癌是全世界最具侵袭性的恶性肿瘤之一,并且被认为是癌症所导致的死亡原因的第六位。鳞状细胞癌是食管癌的主要病理类型,它的发生有显著的地域性差异,特别是在我国的华北地区发病率极高。流行病学研究结果显示,食管癌的病因可能包括：吸烟、微量元素的缺乏和人类乳头瘤病毒等。然而,在食管癌的高发区,如河南.林县,这些危险因素的致病性却很小。有研究表明,在中国的华北地区,食管癌的发生具有明显的家族聚集现象,基因易感性在食.管癌的发生发展过程中发挥重要的作用。在过去的几十年,尽管在技术诊断和放化疗方面取得了极大进步,但患者的预后仍然很差。和其他实体瘤类似,食管癌变也是一个多阶段、多种因素相互作用的发展过程,其中癌基因的激活和抑癌基因的失活发挥重要的作用。到目前为止,食管癌发生的分子机制,如细胞的增殖失调机制等尚不清楚。因此,为了提高食管癌的早期诊断率和治疗效果,系统的研究食管癌的发生发展机制就显得非常有必要。为了研究与食管癌发生机制密切相关的作用因子,我们在河南省林州市收集了从2001年到2004年手术切除的食管癌组织及其癌旁相对正常的组织的石蜡包埋组织样本180例,建立了一套包含临床病理资料及预后情况的组织芯片。另外,我们从河南省食管癌高发地——林州市收集了新鲜食管癌标本及其癌旁相对正常的组织89例,同时提取了组织的DNA和RNA。随后应用Q-PCR技术检测食管癌组织及其癌旁相对正常组织的ADAR1表达情况,发现ADAR1在食管癌组织中的表达明显高于其在癌旁相对正常组织中的表达。研究方法1临床标本的收集我们在河南省林州市人民医院收集了89例手术切除的食管癌组织及其癌旁相对正常的组织,所有的样本都经过常规的甲醛固定、石蜡包埋、切片和HE染色,病理诊断为食管鳞状细胞癌,正常组织中无肿瘤细胞。所有患者术前均无放化疗及免疫治疗史.2方法应用Q-PCR方法检测ADAR1mRNA在89例食管癌及其癌旁相对正常组织中的表达差异；同时应用免疫组织化学方法检测ADAR1蛋白在食管癌组织芯片中的表达差异。为了探讨ADAR1在食管癌细胞中的作用,我们将ADAR1通过脂质体转染入ADAR1低表达的EC109、KYSE180两株食管癌细胞系中,用blasticidin筛选出稳定表达ADAR1的细胞克隆,通过Q-PCR及Western blot验证其表达情况。同时,我们将siADAR1通过脂质体转染入ADAR1高表达的KYSE510食管癌细胞株,用puromycin筛选出稳定表达SiADAR1的细胞克隆,通过Q-PCR及Western blot验证其表达情况。通过细胞增殖实验、平板克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验以及细胞侵袭和迁移实验对ADAR1的功能进行研究。同时,应用流式细胞术检测siADAR1在肿瘤细胞周期中所发挥的作用。研究结果mRNA和蛋白的表达情况均表明ADAR1在食管癌组织中明显高表达。与此同时发现ADAR1的表达和患者术后的预后密切相关。细胞增殖实验、平板克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验以及细胞侵袭和迁移实验均证明ADAR1发挥促进肿瘤形成的作用,细胞系EC109、KYSE180在过表达ADAR1后,细胞的增殖、克隆形成、侵袭与迁移能力均增强。细胞系KYSE510在敲除ADAR1的表达之后,细胞的增殖、克隆形成、侵袭与迁移能力均减弱。进一步的流式细胞术检测发现,ADAR1和肿瘤细胞的细胞周期密切相关,敲除ADAR1的表达,能明显抑制肿瘤细胞从G1期到S期的过渡,从而抑制肿瘤细胞的生长,也就是说ADAR1能促进肿瘤细胞的生长。结论综上所述,我们认为/ADAR1在食管鳞状细胞癌中表达明显升高,其促进肿瘤细胞的增殖、侵袭与迁移。它的高表达是食管癌患者不良预后的独立危险因素。