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鸡球虫病是一种由艾美耳属球虫引起的呈世界性分布的寄生虫病,给养鸡业造成巨大的经济损失。常见的鸡球虫有七种,包括柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)、毒害艾美耳球虫(E. necatrix)、堆型艾美耳球虫(E. acervulina)、巨型艾美耳球虫(E. maxima)、布氏艾美耳球虫(E. brunetti)、和缓艾美耳球虫(E. mitis)和早熟艾美耳球虫(E. praecox),这七种球虫在临床上多呈混合感染。本研究对江苏地区18个鸡场鸡球虫感染情况进行了流行病学调查,发现江苏省内18个鸡场内12个鸡场存在球虫感染,感染率为66.7%。经过ITS1-PCI检测,发现阳性样品多呈几种艾美耳球虫的混合感染。其中,柔嫩艾美耳球虫感染率最高,达91.7%,是江苏地区的优势虫株；堆型艾美耳球虫的感染率为33.3%；布氏艾美耳球虫为8.3%；巨型艾美耳球虫为58.3%；和缓艾美耳球虫为50.0%；毒害艾美耳球虫为50.0%；早熟艾美耳球虫为33.3%。通过对琼脂分离单球虫卵囊方法进行改进,建立了球虫单卵囊分离技术,应用该技术成功地分离出两株球虫卵囊,即和缓艾美耳球虫江苏株(E. mitis-JS)和早熟艾美耳球虫江苏株(E. praecox-JS),并对分离到的虫株分别进行了形态学和分子生物学鉴定。结果表明E. mitis-,JS株卵囊的大小为13.8-18.2μm×12.0～16.7μm,平均大小为15.3μm×13.6μmμm.卵囊指数为1.13; E. praecoxJS卵囊的大小为18.3-22.1μm×15.1-18.9μm,平均大小为19.5μm×16.1μm,卵囊指数为1.21。提取卵囊基因组,设计特异性引物对两株卵囊进行PCR鉴定,分别成功扩增出306bp和368bp特异性片断,进一步证明所分离球虫为和缓艾美耳球虫和早熟艾美耳球虫。以不同的剂量(1000、5000、10000、100000和200000个卵囊/羽)的E. mitis-Jl和E. praecox-JS的经口感染7日龄罗曼公鸡,研究其致病性。结果表明,随着感染剂量的增加,鸡只增重减少,肠道病变逐渐加重。当感染剂量大于10000时,感染组与对照组的平均增重差异均为显著(P<0.05)。两个虫种均能引起肠绒毛断裂,上皮细胞变性、坏死等病理变化,感染剂量到达100000时,可见肝脏和脾脏明显出血。用ELISA方法测定感染鸡血清IgG和肠道IgA水平,发现感染组较对照组IgG和IgA均有增加,两种球虫均在感染剂量为5000时,引起的IgG、IgA变化最显著。随后,又对E. mitis-J和E. praecox-JS的免疫原性进行了研究。将两种球虫分别以不同的剂量(100、500、1000、5000个卵囊/羽)经口接种7日龄罗曼公鸡,14d后用100000个卵囊/羽的剂量感染所有的免疫鸡只,通过平均增重、OPG等指标研究其免疫原性。实验结果表明,E. mitis-js免疫剂量为5000时,鸡只增重率由41.1%上升为84.9%,OPG由的3.23±0.58×105下降为0.84±0.46×105；E. praecox-JS在免疫剂量为5000时,鸡只增重率由41.1%上升为82.1%,OPG由3.98±0.71×105下降为1.16±0.52x105。两种球虫均在免疫剂量为5000时达到最佳的免疫效果。