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目前研究表明机体的免疫状态是决定着肿瘤发展、转移的主要因素,所以机体抗肿瘤免疫的病理生理机制越来越受关注。如果把肿瘤看成为“邪”的范畴,那机体的免疫状态就是“正”的范畴,这与中医学“邪正”理论密切相关。随着对肿瘤病理生理逐步深入的研究,“邪正”的内涵也随之有了新的认识。而祛邪法作为针对这些邪气的治疗方法,在抗肿瘤过程中的作用机制也随之不断被阐述,在临床也因此被不断广泛运用。
由于细胞因子参与抗肿瘤免疫的各个环节,并起着十分重要的作用。因此不同细胞因子介导的机体免疫状态及其介导的机制成为了研究的热点。
其中抑制性细胞因子在肿瘤发展转移过程扮演着重要的角色,主要以IL-4、IL-6、IL-10等Th2型细胞因子以及转化生长因子β(TGF-β)以及前列腺素E2(PGE2)为代表。目前研究证实这类因子可诱导机体处于免疫抑制状态从而促进肿瘤的发展、转移,属于中医“邪”的范畴。
基于上述认识,本实验在前期研究证实三物白散可通过逆转Th1/Th2型细胞因子、降低VEGF表达、促进巨噬细胞分泌Th1型细胞因子IL-1β、TNF-α而降低抑制性因子IL-6的分泌以实现免疫正相调节作用的基础上,进一步探讨该方在抗肿瘤过程中能否通过影响TGF-β以及PGE2的分泌而达到免疫调节作用。
实验研究部分首先对三物白散制备工艺进行改进,主要是巴豆霜的制备。再从整体水平研究巴豆油含量不同的三物白散的抗肿瘤效应。分别制备巴豆霜含油量为5%、10%、20%的三物白散(以下简称5%、10%、20%药物组)进行抗肿瘤效用研究并用CTX组进行对照。结果表明阳性对照组和巴豆油含量不同的三物白散皆有明显的抗肿瘤效应,其中以巴豆霜含油量为10%药物组抗肿瘤功效最佳,胸腺及脾脏指数表明其能明显改善机体的免疫状态。并用ELISA方法对正常组及各组血清中TGF-β1以及PGE2含量进行检测。结果发现,模型组的TGF-β1显著高于正常组,表明荷瘤体确实存在免于抑制状态,药物组TGF-B1以及PGE2含量与模型组和阳性对照组相比,皆不同程度降低,差别具有统计学意义,表明三物白散可通过影响荷瘤鼠体内TGF-β1、PGE2的分泌来调节免疫,且仍以10%药物组效果最好。
再用整体水平抗肿瘤效应较好的5%、10%药物组进行体外研究。药物等比稀释成不同浓度干预肿瘤细胞,结果表明新法制备的三物白散在体外同样具有明显的抑瘤效应,并与药物浓度呈正相关,且10%优于5%药物组。对药物作用后上清中TGF-β1、PGE2的含量进行检测,结果同样表明三物白散可减少两者的产生,从而进一步证实三物白散可以通过影响肿瘤细胞分泌抑制性因子而达到免疫调节作用。
本实验结果表明三物白散可通过干预荷瘤体抑制性细胞因子的分泌而改善机体的免疫抑制状态,达到抗肿瘤免疫调节作用。至于其如何干预的机制以及是否主要与三物白散中某个有效成分有关,有待进一步研究。