第一部分 南药“青天葵”总黄酮制备工艺优化目的：本文以南药“青天葵”中的有效组分黄酮类成分为研究对象,进行提取、纯化工艺和质量评价研究,以期为青天葵中黄酮类成分的开发利用提供工艺参数和质量评价方法。南药“青天葵”为兰科芋兰属植物毛唇芋兰Nervilia fordii (Hance) Schltr.的块茎和全草。其味甘凉、性寒、无毒,可清热润肺、解毒消肿。青天葵的黄酮类成分是其主要的化学成分类群,故本论文对青天葵总黄酮的制备工艺进行进一步的完善和优化,采用HPLC-MS法对其进行质量控制,为青天葵总黄酮的有效利用、新药开发和产业化生产提供科学依据,具有重要的实用价值。方法：1.采用单因素试验和正交试验,研究青天葵总黄酮提取工艺,以总黄酮、单体黄酮以及总固物含量三个指标进行综合评价,更加合理、全面的优选出青天葵总黄酮的最佳提取工艺。2.比较了6种大孔树脂(AB-8、D101、HPD-100、HP-20、X-5、NKA-9)对青天葵总黄酮的吸附效果和解析效果,优选效果最佳的大孔树脂对青天葵总黄酮进行纯化,优化工艺参数,提高青天葵总黄酮的纯度,经冷冻干燥法制备青天葵总黄酮提取物。3.采用HPLC-MS对青天葵总黄酮提取物进行定量分析,测定其中主要的7个黄酮类化合物含量,分析条件为：安捷伦6460三重四级杆LC-MS联用仪,Agilent SB-C18色谱柱(3.0×50mm,2.7μm)。流动相A为乙腈,B为0.1%乙酸水溶液,梯度洗脱：0-1 min,20%-30% A,1-3 min,30%-60% A,3-4 min,60%-70% A。流速0.4 ml/min,进样量5 μL,柱温25℃。离子化方式为电喷雾离子化(ESI),负离子模式,多离子反应监测模式(MRM)。比较不同批次制备工艺间的差异,对其质量进行控制。结果：1.采用单因素考察结合正交试验法对青天葵总黄酮提取工艺进行优化,最佳提取工艺为青天葵药材加12/10倍量的80%乙醇,加热回流提取两次,每次1h。总黄酮含量为4.6%。2.以芦丁为对照品,A1C13为显色剂,紫外分光光度法建立总黄酮含量的测定方法,青天葵总黄酮样品在410 nm处有最大吸收。通过筛选确定采用AB-8型大孔树脂进行纯化,最佳纯化工艺为：上样浓度2.0mg/ml,上样量为3.5 BV,上样液pH值为4,上样流速2 BV/h,先用3 BV去离子水冲洗,再用5 BV的70%乙醇溶液,以1 BV/h流速洗脱,收集70%乙醇洗脱液,回收溶剂后,冷冻干燥即得。3.采用HPLC-MS法测定青天葵总黄酮部位的7个主要黄酮类化合物含量：共测定了7批自制的青天葵总黄酮部位样品,其中以沙苑子苷(NF-1)含量最高,其平均含量为51.43mg/g,4’-O-β-D-葡萄糖鼠李秦素-3-O-β-D-木糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷(NF-2)含量次之,其平均含量为12.35 mg/g,其余各黄酮平均含量在0.1～1.0 mg/g。各批次之间含量无显著性差异,说明本实验优化的工艺较为稳定,可用于大批量的生产和制备青天葵总黄酮,同时对青天葵总黄酮质量控制提供参考。结论：本文以青天葵总黄酮部位为研究对象,进行提取、纯化工艺的研究,以期为青天葵总黄酮的工业化生产提供理论和试验依据。同时对青天葵总黄酮部位进行化学成分分析,可以更好的控制青天葵总黄酮部位的质量,为新药开发利用和质量评价提供参考依据。3.采用HPLC-MS法测定青天葵总黄酮部位的7个主要黄酮类化合物含量：共测定了7批自制的青天葵总黄酮部位样品,其中以沙苑子苷(NF-1)含量最高,其平均含量为51.43mg/g,4’-O-β-D-葡萄糖鼠李秦素-3-O-β-D-木糖-(1→4)-β-D-葡萄糖苷(NF-2)含量次之,其平均含量为12.35 mg/g,其余各黄酮平均含量在0.1～1.0 mg/g。各批次之间含量无显著性差异,说明本实验优化的工艺较为稳定,可用于大批量的生产和制备青天葵总黄酮,同时对青天葵总黄酮质量控制提供参考。结论：本文以青天葵总黄酮部位为研究对象,进行提取、纯化工艺的研究,以期为青天葵总黄酮的工业化生产提供理论和试验依据。同时对青天葵总黄酮部位进行化学成分分析,可以更好的控制青天葵总黄酮部位的质量,为新药开发利用和质量评价提供参考依据。目的：从一点红中提取分离并鉴定得到特征性化学成分,建立专属性较强的一点红质量标准,为2015版《中国药典》收录一点红药材质量标准提供参考。第二部分 南药“一点红”质量标准研究目的：一点红为菊科植物一点红Emilia sonchifolia(L.)DC的干燥全草。主产于贵州、广西、广东、云南、福建、江西等地。其性味苦凉,能清热解毒、凉血利尿、散瘀消肿,是民间常用药物。但有关一点红质量研究鲜有报道,其质量标准曾收录于1977版《中国药典》,之后各版再未收录。近年来在广东、湖南和福建三省的地方标准中均有收录,现行的质量标准缺乏专属性,有待进一步提高。一点红药材中主要含有黄酮类、生物碱、三萜、酚类等化学成分,故本实验将一点红药材中生物碱和黄酮类成分作为研究对象,分离并鉴定得到特征性化学成分,进行薄层色谱和含量测定研究,以期提高一点红的质量标准,为2015版《中国药典》收录一点红药材质量标准提供依据。方法：1.通过查阅文献以及采集样品,对一点红进行性状鉴别、显微鉴别。制作了茎横切片、叶横切片、叶表面撕片、粉末片。2.从一点红甲醇提取物的正丁醇萃取部位进行系统分离,采用凝胶、硅胶、反相硅胶柱层析方法,得到克氏千里光碱,同时从一点红药材中检测到槲皮苷,采用核磁、紫外、红外、质谱法对其结构进行鉴定,并采用薄层法,液相色谱法对其纯度进行测定。3.以分离得到的专属性强的克氏千里光碱和槲皮苷为对照品,进行薄层色谱鉴别和含量测定研究,利用高效液相色谱法测定了13批一点红药材中克氏千里光碱和槲皮苷的含量,优化提取方法和色谱条件,根据测定结果,提出限度建议。4.对一点红中的化学成分进行分析,按照2010版《中国药典》一部附录项下规定的方法对13批一点红药材系统的进行“水分”、“总灰分”、“酸不溶性灰分”、“水溶性浸出物”、“醇溶性浸出物”、“挥发性醚浸出物”检查。结果：1.一点红药材的显微鉴别主要以叶表面撕片和粉末为主,叶表面撕片可见不定式气孔,粉末中可见非腺毛、花粉粒及螺纹、网纹、具缘纹孔导管。2.从一点红中分离得到克氏千里光碱,检测到槲皮苷,经过纯度检验,两个对照品的纯度均大于98%,可用于成分分析,同时为其作为一点红质控对照品提供依据。3.在薄层鉴别中,以克氏千里光碱为对照品,展开剂为氯仿-甲醇(8：1),槲皮苷为对照品,展开剂为乙酸乙酯-丙酮-乙酸-水(4：1：0.5：0.5),建立了标准药材和两种对照品进行双重对照,该方法专属性高,分离效果好,色谱斑点清晰,展开后Rf值适中,对一点红的鉴别适应性和重现性较好。采用HPLC法,对13批一点红药材中的槲皮苷和克氏千里光碱进行含量测定：槲皮苷的含量在0.05～0.58 mg/g,平均含量0.33 mg/g,建议其含量不低于0.16 mg/g。克氏千里光碱的含量在0.15～0.81 mg/g,平均含量为0.40 mg/g。：一点红药材的日服用量干品不得超过20 g,鲜品不得超过30 g。4.按照2010版《中国药典》一部附录项下规定的方法对13批一点红药材系统的进行测定,结果建议本品水分不得过15.0%、总灰分不得超过19%、酸不溶性灰分不得超过9%,水溶性浸出物不得少于15.0%,醇溶性浸出物不得少于6%、挥发性醚浸出物不得少于0.22%。结论：本实验对一点红药材进行系统的质量标准研究,补充完善了一点红的性状鉴别和显微鉴别,通过对13个批次一点红药材的“水分”、“灰分”、“浸出物”测定,提出了限度建议,另外对一点红中代表性成分生物碱类和黄酮类成分进行分离鉴定,得到具有专属性的对照品槲皮苷和克氏千里光碱,建立薄层鉴定和含量测定方法,从定性和定量两个方面进一步的补充和完善一点红的质量标准,有利于一点红的开发利用。