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目的:通过慢病毒介导Fas-si RNA和Sox9体内转染兔退变髓核细胞,观察单基因转染与双基因联合转染对退变椎间盘的生物学效应。研究方法:将健康成年新西兰大白兔随机分为5组:A.PBS组,B.空病毒组,C.Fas-si RNA组,D.Sox9组,E.双基因组;针刺椎间盘建立新西兰大白兔退变椎间盘模型,使用微量注射器分别向5组实验兔椎间盘内注入20μL的PBS磷酸盐缓冲液、慢病毒、r LV-h Fas-sh RNA、r LV-h Sox9、r LV-h Fas-sh RNA+r LV-h Sox9;转染后第8周、12周、24周分别对实验动物进行MRI扫描观察其椎间盘信号变化。然后处死实验动物,取出退变椎间盘,应用Western-Blot技术检测椎间盘内II型胶原、蛋白多糖水平,应用RT-PCR技术检测Fasm RNA和Sox9 m RNA表达水平。结果:转染后第8周、12周、24周对实验动物行MRI扫描,观察椎间盘MRI T2加权像信号强度,结果显示:A、B组实验动物退变椎间盘的MRI T2加权像信号较C、D、E组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),A、B两组退变椎间盘MRI T2加权像信号强度相差不大,差异无统计学意义(P>0.05),E组退变椎间盘的MRI T2加权像信号强度高于C、D组,差异有统计学意义(P<0.05);处死实验动物,取出退变椎间盘后,应用Western-Blot技术检测各组椎间盘II型胶原水平,结果显示:C、D、E组椎间盘II型胶原水平与A、B组相比均显著提高,差异有统计学意义(P<0.05),C、D组椎间盘II型胶原水平相差不大,差异无统计学意义(P>0.05),E组椎间盘II型胶原水平均高于C、D组,差异有统计学意义(P<0.05);应用Western-Blot技术检测各组椎间盘蛋白多糖水平,结果显示:C、E组分别与D、A、B组两两比较,椎间盘内蛋白多糖水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);A、B、D组椎间盘内蛋白多糖水平相差不大,差异无统计学意义(P>0.05);E组椎间盘内蛋白多糖水平较C组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);应用RT-PCR技术检测各组椎间盘Fas m RNA和Sox9 m RNA的表达情况,结果显示:C、E组与A、B、D组比较椎间盘Fas m RNA表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),A、B、D组椎间盘Fas m RNA表达水平相差不多,差异无统计学意义(P>0.05),E组椎间盘Fas m RNA的表达水平低于C组,差异有统计学意义(P<0.05);C、D、E组椎间盘Sox9 m RNA的表达水平明显高于A、B组,差异有统计学意义(P<0.05),A、B组椎间盘Sox9 m RNA表达水平相差不多,差异无统计学意义(P>0.05),D组椎间盘Sox9 m RNA的表达水平高于C组,差异有统计学意义(P<0.05),E组椎间盘Sox9 m RNA的表达水平高于D组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:慢病毒介导Fas-si RNA和Sox9体内转染兔退变椎间盘可以抑制细胞外基质中II型胶原、蛋白多糖的降解,减少髓核细胞凋亡,增加细胞外基质中II型胶原、蛋白多糖含量,从而延缓椎间盘的退变。双基因联合转染较单基因转染延缓椎间盘退变的效果更好,双基因联合转染对延缓椎间盘退变具有协同作用。