草莓叶片的离体再生及遗传转化研究

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该文以草莓叶片为外植体,建立高频稳定再生体系,并以根癌农杆菌为介导将NPTⅡ基因及GUS基因转入草莓,得到稳定表达外源基因的草莓植株.通过对10个品种及26种培养基的选择试验,筛选出适于用做遗传转化的草莓无性系D及具有高频率再生潜力的品种L、S、B、C、H<,6>.其中,组培苗D叶片在MS+BA 3.0mg/L+IBA 0.5mg/L培养基上,再生频率可稳定在80-85%,每叶片平均再生芽数可达6.7~7.4个.影响叶片离体再生不定芽因素的研究结果表明,基因型,外源激素种类、浓度及配比,苗龄,培养条件对再生芽的频率及数量都有不同程度的影响,其中基因型是限制因子,外源激素是影响芽分化的关键因素.采用叶盘法对组培苗D叶片进行遗传转化,在筛选培养基中获得了34.6%的再生芽,其中11.4%经组织化学染色法检测表现为GUS阳性,这些转化芽可在附加卡那霉素的继代培养基中正常生根,成为完整转化植株.该转化系统的建立为目的基因导入奠定了基础.
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