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大肠杆菌脂肪酸合成属于Ⅱ型脂肪酸合成体系。其fabG基因编码3-酮基脂酰ACP还原酶(FabG)，它可以催化3-酮基脂酰ACP的还原。作为大肠杆菌脂肪酸合成调控的一个重要位点，FabG的功能研究得到越来越多的关注。 本研究围绕大肠杆菌FabG的结构和功能进行研究。EcFabG拥有SDR家族酶蛋白特征，存在3个保守的氨基酸残基，分别是138位的丝氨酸、151位的酪氨酸和155位的赖氨酸，3D结构分析预测它们是该酶催化的必需氨基酸。本研究从体内遗传互补和体外酶活性检测两个方面，验证这3个位点突变后酶蛋白的生物学特性。 将EcFabG138位丝氨酸，151位酪氨酸，155位赖氨酸进行定点突变，单位点突变和二联体突变后的ecfabG基因仍然能互补大肠杆菌fabG温敏突变株CL104，只有FabGS138A-Y151F-K155T三联突变不能互补CL104。在体外脂肪酸合成反应体系中检测EcFabG突变体蛋白的酶活性，发现与平板互补结果类似，EcFabG单位点突变和二联突变体蛋白仍然具有较强的3-酮基脂酰ACP还原酶活性，只有FabGS138A-Y151F-K155T三联突变体蛋白突变后酶活性微弱。 对FabGS138A、FabGY151F、FabGK155T这3个突变蛋白，以及他们两两组合和3联组合突变的蛋白酶活力进行分析，结果显示在同等条件下，各突变蛋白的酶活力都有不同程度的降低，但并没有丧失催化活性。 本研究证明FabG138位的丝氨酸，151位酪氨酸和155位赖氨酸不是参与3-酮基脂酰ACP还原酶催化反应的必需氨基酸，它只作为结构氨基酸，在维持FabG的二级结构稳定性方面起作用。