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急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)是一种由于直接或间接致伤因素导致肺部细胞受损,产生失控性反应的肺病理性损伤。严重时则导致急性呼吸窘迫综合征(Acute respiratory distress syndrome,ARDS),也是新冠肺炎主要的致死因素之一。此外,ALI是危害人类健康且死亡率高达40%的重大疾病。它因发病机制复杂而引起人们的重视。目前,已有许多研究表明,一些抗炎、抗氧化与抗凋亡药物对ALI具有潜在治疗作用,但仍存在一些不良影响。因此,寻找更有效的防治方法意义重大。黑果腺肋花楸(Aronia melanocarpa)是一种十分特别的小浆果,它的果实中富含多种营养物质,特别是多酚类物质。而花色苷作为其主要的多酚类物质具有十分广泛的功效,如抗炎效应。但花色苷的抗炎作用对ALI是否产生抑制以及相关作用机制报道鲜少。因此,本文对黑果腺肋花楸花色苷提取与纯化、种类鉴定、体外抗氧化能力,对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的抗炎修复作用进行研究,以期对急性肺损伤辅助治疗方法及药物加工处理方式提供新的思路。主要研究结果如下:采用单因素试验和响应面优化常规酸化乙醇提取法(Et OH)、天然低共熔溶剂(NADES)提取法、超声-微波协同乙醇提取法(UMAE-Et OH)及超声-微波协同天然低共熔溶剂提取法(UMAE-NADES)的工艺条件。以花色苷提取含量为指标,从试验周期、耗能、耗材等方面综合考虑,对四种提取方法进行比较。Et OH最佳工艺条件为乙醇体积分数60%、料液比1:36 g/m L、提取时间72 min、提取温度60°C,得到花色苷含量为2.996±0.013 mg/g,提取率为82.25±0.80%;NADES的最佳工艺条件为种类选择氯化胆碱-甘油(Ch Gly)、摩尔比1:2、含水量30%、料液比1:26 g/m L、提取时间51 min、提取温度51°C,得到花色苷含量为3.311±0.018 mg/g,提取率为87.66±0.67%;UMAE-Et OH的最佳工艺条件为料液比1:25 g/m L、提取时间485 s、提取温度45°C、微波功率226 W,得到花色苷含量为3.599±0.09 3mg/g,提取率为93.09±0.75%;UMAE-NADES的最佳工艺条件为料液比1:15 g/m L、提取时间367 s、提取温度52°C、微波功率230 W,得到花色苷含量为4.456±0.032 mg/g,提取率为97.05±0.85%。与其他三种方法相比,UMAE-NADES提取花色苷含量高且具有用时短的优点。使用AB-8型大孔树脂对Et OH、NADES、UMAE-Et OH、UMAE-NADES提取的花色苷粗提液进行纯化与鉴定。纯化后,Et OH、NADES、UMAE-Et OH和UMAE-NADES提取的花色苷纯度分别为29.99%、32.88%、36.51%和44.89%。采用高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)对四种方法提取的黑果腺肋花楸花色苷进行种类鉴定,共鉴定出矢车菊-己糖苷二聚体、矢车菊-3-半乳糖苷、矢车菊-3-葡萄糖苷、矢车菊-3-阿拉伯糖苷、矢车菊-3-木糖苷、矢车菊-3,5-二己糖苷六种花色苷。与其他三种方法相比,UMAE-NADES提取的黑果腺肋花楸花色苷在纯化过程中提高了纯度。采用ABTS+·、FRAP、T-AOC三种抗氧化能力测定方法对四种提取方法得到的花色苷进行抗氧化性研究。结果显示黑果腺肋花楸花色苷具有清除ABTS+·自由基、还原铁离子的能力,并且花色苷的FRAP、T-AOC抗氧化能力高于同浓度VC(p<0.05)。UMAE-NADES获得的花色苷的抗氧化能力是其他三种提取方法的1-2倍,其中FRAP和T-AOC抗氧化能力分别是VC的2倍和4.2倍。因此,UMAE-NADES提取纯化后的花色苷具有最强的抗氧化性。利用脂多糖(LPS)诱导小鼠引起急性肺损伤来进行体内研究,以考察黑果腺肋花楸花色苷对ALI小鼠的抗肺炎效果。结果发现,花色苷可以显著缓解ALI小鼠的肺水肿症状,使小鼠肺组织中肺间隔及肺泡腔基本恢复正常,并与阳性对照地塞米松(DXM)修复效果相当。其主要作用机制是通过降低小鼠血清、肺组织及肺泡灌洗液(BALF)中促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达,减少BALF中单核巨噬细胞数、中性粒细胞数及细胞总数,减少肺部MDA的释放、降低MPO酶活性、增加SOD酶活性,从而降低小鼠体内氧化应激反应,并抑制NF-κB相关p65信号通路以及调节IκBα/p-IκBα基因的蛋白表达。通过TUNEL染色发现花色苷可显著降低ALI小鼠体内的细胞凋亡率。这些结论表明黑果腺肋花楸花色苷可以抑制ALI小鼠的炎症反应,具有显著的抗肺炎效果。