SUMO(small ubiquitin-like modifier)化修饰(SUMOylation)是一种新发现的蛋白类泛素化修饰。自发现以来,SUMO化修饰已得到了大量的研究。其功能主要包括调控细胞周期、靶蛋白分子细胞定位/转运、信号转导通路、转录因子活性以及蛋白质的相互作用等。Csk是一种广泛表达的非受体型蛋白质酪氨酸激酶,它可以特异的磷酸化SFKs激酶家族抑制其激酶活性从而发挥抑癌的功能,而Csk功能异常可导致c-Src激酶活性增强从而引起了肝癌、肺癌等肿瘤的发生发展。本课题拟研究鉴定Csk存在SUMO化修饰,并探讨其在肿瘤发生发展中的作用。在本课题研究中,首先,在真核细胞以及原核表达体系中,我们均发现Csk可以发生SUMO化修饰,K53是其主要的SUMO修饰位点。其次,我们对影响Csk发生SUMO化修饰的因素进行研究,发现高氧在一定程度上可以抑制其SUMO化修饰,PIAS3作为其特异的SUMO E3连接酶可以显著的增强Csk的SUMO化修饰,Csk活性调控位点Ser364位的磷酸化不会影响其SUMO化修饰。为探究Csk SUMO化修饰的生物学功能,在Csk敲低的DU145细胞系中回复表达Vector、Csk WT以及SUMO-Csk,通过cck8、平板克隆实验,我们发现Csk的SUMO化修饰可以部分回复Csk导致的细胞生长抑制现象。为进一步探索Csk SUMO化修饰的分子作用机制,在293T细胞体系中通过Co-IP的方法,我们检测了Csk SUMO化修饰与Cbp的相互作用,结果显示,Csk SUMO化修饰减弱其与Cbp的相互结合,并降低c-Src Y527的磷酸化水平,这和SUMO-Csk稳转细胞系的生物学表型相一致。综上,我们的研究发现Csk存在SUMO化修饰,该修饰阻碍Csk与Cbp的结合从而减弱对c-Src的磷酸化抑制作用,促进了c-Src介导的肿瘤的发生发展。