目的:骨肉瘤是儿童和青少年长骨最常见的恶性肿瘤,顺铂是其临床化疗最常用的药物之一,但研究发现骨肉瘤对顺铂耐药的情况经常发生,并且造成治疗失败,然而其具体分子机制的研究结果尚无定论。内质网应激和自噬是生物体细胞内广泛存在的两个生物学过程,与肿瘤的发生发展关系密切。我们所研究的RCAD（别名UFL1;KIAA0776;Maxer;NLBP）是类泛素化系统Ufm1的E3连接酶,主要有增强DDRGK1和CDK5RPA3的稳定性,防止其类泛素化降解及通过间接调节NF-κB信号通路发挥肿瘤抑制等作用。本文旨在研究RCAD影响骨肉瘤细胞的作用及其与自噬及内质网应激的内在联系。糖尿病是仅次于心脑血管疾病和肿瘤之后的第三大非传染性疾病,具有很高的发病率和增长速度,而骨质疏松是其最常见的并发症之一。目前对于糖尿病性骨质疏松的发生机制研究较多且复杂。本课题为了验证RCAD与自噬和内质网应激之间的关系是否具有一定普遍性,因此对RCAD在糖尿病性骨质疏松中所起的作用和机制也进行了初步研究。方法:在对骨肉瘤顺铂耐药的研究中,我们使用慢病毒介导的RNAi技术敲减骨肉瘤细胞系U2OS中RCAD的基因表达,并用顺铂处理细胞,采用Western blot、Realtime PCR、流式细胞术、透射电镜、免疫荧光等技术分析RCAD的表达情况及自噬、内质网应激在骨肉瘤化疗过程中的变化。在对糖尿病性骨质疏松的研究中,我们制作了BALB/c小鼠I型糖尿病模型,并通过micro-CT确定了骨质疏松的发生。之后我们通过免疫组化、Realtime PCR及Western blot检测了RCAD、自噬和内质网应激相关指标的变化。结果:在对骨肉瘤顺铂耐药的研究中,我们将U-2OS细胞系中RCAD的m RNA、蛋白表达成功敲低后,发现细胞的肿瘤生物学行为能力提高,且对顺铂的敏感性降低。机制研究发现RCAD缺失后,GRP78增加,CHOP降低,LC3II增加,p62降低,内源性LC3表达及自噬体、自噬溶酶体形成均增多。顺铂处理后,在Consh RNA组,RCAD减少,GRP78增加,CHOP增加,LC3II增加,p62降低,内源性LC3表达及自噬体、自噬溶媒体形成均增多。而RCAD-sh RNA组中RCAD极度减少,其他指标表达均相反。在对糖尿病性骨质疏松的研究中,我们检测了全骨组织中RCAD、LC3、p62、GRP78及CHOP的表达,发现糖尿病骨质疏松组的RCAD表达降低,LC3II、GRP78及CHOP表达升高,p62降低。结论:敲减RCAD能够增强骨肉瘤细胞对顺铂化疗的耐药性;RCAD下调激活骨肉瘤细胞的内质网应激及自噬;RCAD对于骨肉瘤细胞在顺铂化疗中发生的自噬及内质网应激影响复杂;RCAD表达下调,内质网应激和自噬激活,参与糖尿病性骨质疏松的发病。