1,25-二羟维生素D3对IgA肾病大鼠中白介素-17、RORγt的调节作用

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目的:探讨1,25-二羟维生素D3对实验性Ig A肾病大鼠中IL-17、RORγt的调节作用。方法:选用Wistar大鼠52只,随机选取44只Wistar大鼠,通过采用抗原直接刺激食管粘膜内皮细胞后激活巨噬细胞的方法来制得Ig A肾病模型。正常对照组选取8只给予同等量生理盐水灌胃及皮下与尾静脉注射。于实验第5周将造模组大鼠取两只,杀鼠行病理学检查,经鉴定成功后,剔除死亡大鼠,剩余Ig AN大鼠分为Ig A肾病组(B组)、l,25(OH)2D3治疗组(C组)、强的松治疗组(D组)及强的松+l,25(OH)2D3联合治疗组(E组);C、D、E组分别每日灌喂l,25(OH)2D3(3ng/100g)、强的松(10mg/kg)、强的松+l,25(OH)2D3(剂量同前),A组与正常组(B组)每日灌喂同等量蒸馏水,共7周。治疗7周后检测各组大鼠24小时尿蛋白定量、尿红细胞计数、肌酐、血钙的改变,并用RT-PCR方法检测脾脏中RORγt、IL-17 m RNA的水平;免疫组化及Western blot检测肾脏中RORγt的变化。结果:(1)B组(Ig A肾病组)的24小时尿蛋白定量为49.37±2.96mg/24h;C组(l,25(OH)2D3治疗组)的24小时尿蛋白定量为21.05±2.06mg/24h;D组(强的松组)的24小时尿蛋白定量为15.26±1.57mg/24h;E组(强的松+l,25(OH)2D3治疗组)的24小时尿蛋白定量为10.16±1.39 mg/24h;A组(正常对照组)的24小时尿蛋白定量为7.27±0.86 mg/24h。各组在治疗前后的变化均有统计学意义(p<0.05),其中E组(强的松+l,25(OH)2D3治疗组)下降最显著,差异有统计学意义(p<0.05)。(2)B组(Ig A肾病组)的尿红细胞计数为328±7.04个/μL;C组(l,25(OH)2D3治疗组)的尿红细胞计数为162±5.36个/μL;D组(强的松组)的尿红细胞计数为18±3.06个/μL;E组(强的松+l,25(OH)2D3治疗组)的尿红细胞计数为9±3.15个/μL;A组(正常对照组)的尿红细胞计数为5.03±2.55个/μL。B组(模型组)较A、C、D、E组尿红细胞计数显著升高(p<0.05);经治疗后各组尿红细胞计数均有显著下降(p<0.05),其中E组(强的松+l,25(OH)2D3治疗组)下降最显著,较C、D组有统计学差异(p<0.05)。(3)B组(Ig A肾病组)的RORγtm RNA和IL-17m RNA的水平的相对含量分别为0.8413±0.0013、0.7431±0.0019;C组(l,25(OH)2D3治疗组)的为0.6617±0.0018、0.5942±0.0021;D组(强的松组)的为0.5901±0.0008、0.4531±0.0010;E组(强的松+l,25(OH)2D3治疗组)的为0.3822±0.0007、0.2897±0.0023;A组(正常对照组)的为0.1897±0.0010、0.1342±0.0016。B组(模型组)较A、C、D、E组上述指标均显著升高(p<0.05);经治疗后各组以上指标均有显著下降(p<0.05),其中E组(强的松+l,25(OH)2D3治疗组)下降最显著,较C、D组有统计学差异(p<0.05)。(4)B组(Ig A肾病组)中RORγt的相对含量为0.2871±0.0006;C组(l,25(OH)2D3治疗组)中RORγt的相对含量为0.1741±0.0008;D组(强的松组)中RORγt的相对含量为0.1286±0.0008;E组(强的松+l,25(OH)2D3治疗组)中RORγt的相对含量为0.0945±0.0004;A组(正常对照组)中RORγt的相对含量为0.0233±0.0002。B组(模型组)较A、C、D、E组RORγt的相对含量显著升高(p<0.05);经治疗后各组中RORγt的蛋白相对含量均有显著下降(p<0.05),其中E组(强的松+l,25(OH)2D3治疗组)下降最显著,较C、D组有统计学差异(p<0.05)。(5)B组(Ig A肾病组)中RORγt的蛋白相对含量为0.907±0.001;C组(1,25(OH)2D3治疗组)中RORγt的蛋白相对含量为0.682±0.001;D组(强的松组)中RORγt的蛋白相对含量为0.546±0.002;E组(强的松+l,25(OH)2D3治疗组)中RORγt的蛋白相对含量为0.405±0.005;A组(正常对照组)中RORγt的蛋白相对含量为0.315±0.004。经干预后各组RORγt的蛋白相对含量较B均有下降(p<0.05),其中E组(强的松+l,25(OH)2D3治疗组)下降最显著,差异均具有统计学意义(p<0.05)。结论:1)IL-17、RORγt可能参与Ig A肾病的发病;2)1,25(OH)2D3可能通过直接或间接下调RORγt、IL-17对Ig A肾病起到一定的免疫调节作用。
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