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目的:①Mn1-xZnxFe2O4(锰锌铁氧体)磁性纳米粒子的制备及表征:②纳米As2O3磁性脂质体的制备工艺及特性检测:③纳米As2O3磁性脂质体联合磁流体热疗治疗卵巢癌的体外实验研究。
方法:①采用改良的湿化学法制备Mn1-xZnxFe2O4磁性纳米粒子,用透射电镜、XRD及热分析系统等进行表征,在高频交变磁场下进行其磁流体的体外加热试验,MTT实验检测其细胞毒性。②采用薄膜-超声法加高速搅拌制备纳米As2O3磁性脂质体,用能谱仪、电镜、原子荧光分光光度计、原子吸收分光光度计、图像分析仪和离心方法进行特性研究;③以培养液做对照,分别将空白脂质体、As2O3溶液、纳米As2O3脂质体、纳米磁性脂质体及纳米As2O3磁性脂质体作用于卵巢癌HO8910细胞,以证明药物治疗、热疗及两者共同作用的抗癌效果,并用电子显微镜、流式细胞仪、MTT法对治疗效果加以检测:④以RT-PCR及免疫组化方法研究nm23H1、c-myc的mRNA及蛋白表达水平。
结果:①制备所得Mn1-xZnxFe2O4粒径约20-40nm,磁响应性较好。XRD谱图检索数据库证明为锰锌铁氧体。37℃及50℃下所制备的浸渍液均无细胞毒性,居里温度随锰锌比例的不同分布在97℃-140℃之间,其磁流体在高频交变磁场下可升温至35℃-47℃并保持恒定,其升温过程受磁流体浓度、MnxZn(1-x)Fe2O4中锰锌比例和磁场强度的影响;②As2O3磁性纳米脂质体粒径为182nm±125nm,为单室或多室,其中含有砷和锰、锌、铁等成份,As2O3的药物包封率为71.16%,缓释性好:③在高频交变磁场下,纳米As2O3磁性脂质体对人卵巢癌细胞的生长具有强烈的抑制作用并具有诱导其凋亡的作用,该组细胞的生长抑制率(63.15%)明显高于游离As2O3组(31.71%,P<0.05)、纳米As2O3脂质体组(41.16%,P<0.05)和纳米磁性脂质体组(54.61%,P<0.05),该组细胞的凋亡率也高于其他各组。而空白脂质体和高频交变磁场对细胞生长无抑制作用:④As2O3使nm23H1的表达上调,热疗对其无影响,单纯As2O3及热疗均使c-myc的表达下调,纳米As2O3磁性脂质体的热化疗作用对c-myc的下调表达更为显著。
结论:①采用改良的湿化学法成功制备锰锌铁氧体磁性纳米粒子,并采用薄膜-超声法加高速搅拌可以成功制备纳米As2O3磁性脂质体。②纳米As2O3磁性脂质体在高频交变磁场作用下可升温控温治疗肿瘤。③在高频交变磁场下,游离As2O3、纳米As2O3脂质体、纳米磁性脂质体、纳米As2O3磁性脂质体治疗人卵巢癌HO8910细胞均有效,以纳米As2O3磁性脂质体的效果最佳。本研究所采用的纳米As2O3磁性脂质体联合磁流体热疗技术具有双重抗癌功能,为卵巢癌和其他实体瘤的治疗提供了一条新途径。