葡萄籽原花青素的分离提纯及抗氧化性研究

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本论文以新疆新天葡萄酒厂下脚料——红葡萄籽为原料,研究提取葡萄籽原花青素工艺。提出了比较适宜的葡萄籽原花青素定性定量检测方法,研究按聚合度区段对原花青素进行分级分离纯化工艺,对原花青素的抗氧化、自由基清除能力进行初步研究。主要研究结果如下:采用硫酸-香草醛比色法测定葡萄籽中原花青素含量。应用本方法对新疆几种不同产地发酵/未发酵的葡萄籽原花青素含量进行测定,结果表明原花青素的提取应选择未发酵的葡萄籽作为原料。用TLC对提取产品进行初步分析,其成分组成与标准样品基本一致。以薄层制备的方法分离出来的原花青素为单体、二聚体、三聚体。研究了不同聚合度原花青素组分的抗氧化活性、O2-·的清除能力。结果表明在亚油酸体系中低聚原花青素的抗氧化性明显高于Vc和Ve,邻苯三酚自氧化体系中低聚原花青素对O2-·的清除能力很强,说明低聚原花青素是一种有效的自由基清除剂。对葡萄籽原花青素的稳定性进行了研究,表明较低的温度和较低的pH值条件下原花青素比较稳定。光照可使葡萄籽原花青素含量逐渐下降。金属离子中以Sn2+、Fe2+和Cu2+对葡萄籽原花青素影响最为显著。对葡萄籽原花青素的提取工艺进行优化,以70%乙醇为溶剂、提取温度为40℃,固液比为1:7,提取时间为30min,提取次数为3次。得到原花青素粗品的提取率为40.21%,粗品纯度为41.73%。再通过柱层析法,以ADS-8大孔吸附树脂分离纯化原花青素,得到纯度较高(百分含量>95%)的低聚原花青素。优化工艺条件后制备的产品,纯度为95.25%,得率为1.87%。对其分级分离特性的研究表明,采用ADS-8树脂吸附分离原花青素,通过逐步提高乙醇浓度可以将原花青素按聚合度由低到高的顺序依次洗脱下来,从低浓度乙醇洗脱液中可以得到低聚体含量相对较高的组分,并且适用于原花青素的工业化生产过程。
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