目的：构建携带HIV-1vpr基因的重组腺病毒,并研究vpr基因对胶质瘤细胞系U251的作用。 方法：利用Adenovirus Expression系统,通过含有目的基因片段vpr的穿梭载体pGSTrak-C-Vpr和骨架质粒pAdeno在细菌内LR重组的方法,构建重组腺病毒质粒pAdeno-Vpr。将重组质粒转染293细胞,包装出重组腺病毒rAd5-Vpr。应用MTT法观察重组腺病毒rAd5-Vpr转染U251细胞后细胞的增殖活性的变化。应用RT-PCR法检测转染后U251细胞的mRNA表达情况。用Annexin V-FITC/PI双色标记法检测转染后U251细胞的凋亡状态。 结果：成功构建重组腺病毒rAd5-Vpr。重组腺病毒rAd5-Vpr转染U251细胞后,镜下观察细胞生长减慢、代谢受到抑制并促进细胞凋亡。MTT吸收值在重组腺病毒rAd5-Vpr转染U251细胞后48小时下降,与正常对照组和阴性对照组相比都具有统计学意义(p<0.05)。RT-PCR结果显示：在mRNA水平上,重组腺病毒rAd5-Vpr在胶质瘤细胞系U251细胞中能够有效的表达。流式细胞仪检测结果表明：重组腺病毒rAd5-Vpr转染U251细胞后48小时和72小时对细胞凋亡均有明显的诱导作用。 结论：构建的重组腺病毒rAd5-Vpr能够有效的在U251细胞内表达,并抑制胶质瘤细胞系U251的增殖,诱导其凋亡,本实验结论为后续的蛋白组学及多基因联合基因治疗胶质瘤奠定基础。