hTNFα基因转化灵芝的研究及短小芽孢杆菌(AS1,127)xylanaseB基因的克隆和表达

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灵芝是一种经济价值很高的大型药用真菌,现代医学研究已经证明,灵芝对癌症、肝炎、心血管疾病等多种严重威胁人类生命的疾病具有较好的疗效.应用现代生物技术改良灵芝,增强灵芝药效,是中药现代化的一个重要途径.hTNFα是免疫调节系统中介导多向性炎症反应的免疫调节反应的细胞因子,具有广泛的生物学活性.在诱导肿瘤细胞坏死、免疫调节、抗病毒、炎症等细胞反应中TNF具有重要作用.TNF基因转化进灵芝中表达会使灵芝抑制肿瘤和增强免疫力的药效得到加强.将TNF基因两端分别与灵芝8基因的启动子和色氨酸合成酶终止子相连,成功地构建了带有潮霉毒抗性筛选标记的灵芝表达载体pCAN-TNF,将该载体用农杆菌介导的双元载体法转化灵芝,获得转TNF基因灵芝菌株1#.对其进行PCR及Sourthern blot检测结果表明:TNF基因已整合到灵芝基因组中.ELISA检测结果表明转TNF基因灵芝菌株1#中TNF蛋白的表达量为0.1mg/g.关于转TNF基因灵芝的药理和临床试验,将是我们下一步研究工作的重点.
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