传染性法氏囊病(infectious bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)引起的雏鸡的一种急性、高度接触性、致死性传染病。传染性法氏囊病病毒(IBDV)以鸡的免疫系统为靶器官,造成其免疫抑制。IBDV有血清I型和II型,仅血清I型对鸡致病。血清I型病毒由于发生过两次大的变异,到目前为止出现了三种毒株:经典毒、变异株和超强毒株。目前,国内外针对IBDV基因功能及侵染机制的研究主要还是利用细胞适应株或经典株,针对超强毒株的研究还是相对较少。超强毒株与弱毒株在致病机制上的差异值得深入研究。本研究选用IBDV超强毒Gx株、弱毒Gt株作为试验毒株,就它们对SPF鸡的致病特性进行了研究,以期在临床致病特性、组织器官病理变化以及感染后靶细胞凋亡和坏死情况等方面寻找差异。结果表明,vvIBDV具有较高的致死率,与弱毒相比vvIBDV能引起感染鸡靶细胞快速凋亡坏死,引起法氏囊组织发生严重的病理变化,导致感染鸡免疫系统的严重损伤。导致鸡的急性死亡。为了降低法氏囊B淋巴细胞体外培养的凋亡速度,更好地研究IBDV强弱毒侵染B淋巴细胞的情况。本研究设计分泌表达鸡源CD154分子的功能区。根据GenBank中鸡CD154的参考序列克隆其编码区。通过融合PCR将CD154的C端与小鼠CD8α蛋白的N端串联,并连接信号肽以利于分泌表达。结果显示,融合蛋白成功表达,表达量随时间的延长而增加,并且能够成功分泌到细胞外。鸡CD154分子功能区的成功表达,为更好地在体外研究IBDV感染B淋巴细胞提供了很好的基础。在前两部分内容的基础上,本研究利用IBDV强弱毒分别感染体外培养的鸡原代B淋巴细胞,通过利用测定IBDV强弱毒感染B淋巴细胞后不同时间点的TCID50和ELD50以及通过荧光定量PCR等方式比较IBDV强弱毒在B淋巴细胞上复制特性,来进一步研究IBDV强弱毒致病性差异的机制。结果显示,vvIBDV能够在其B淋巴细胞上快速复制,能够在感染后很短的时间复制大量的病毒,合成大量的病毒蛋白,从而引起靶细胞的快速凋亡和坏死。综上所述,IBDV超强毒能够引起感染鸡的急性死亡,主要原因是在vvIBDV在感染鸡后,能够在其靶器官法氏囊中快速复制增殖,并引起大量B淋巴细胞快速凋亡和坏死,引起淋巴组织快速的出现病变,致使感染鸡快速发病,急性死亡。本研究在体内外比较IBDV强弱毒的复制特性,并利用体外培养原代B细胞的方法研究IBDV强弱毒在靶细胞上的复制能力。