目的:心梗后心肌细胞缺血损伤,导致肥大、纤维化,导致心肌增厚、心室扩张至不可逆的心肌重构,心脏功能逐渐恶化并最终发展为心力衰竭。由损伤相关分子模式引起的过度炎症被认为是心功能不全和重构的主要原因之一。参与天然免疫系统激活的Toll样受体(Toll-like Receptors,TLRs)起着重要作用。Toll样受体(TLRs)作为模式识别受体,在识别微生物相关分子模式和免疫反应中起着重要作用。Toll样受体-9(TLR9)通过与特定配体结合而激活先天免疫系统。它不仅调节炎症反应和血管生成,而且与自噬和细胞凋亡密切相关。本实验旨在探究TLR9在急性心梗中的作用,重点关注TLR9对急性心肌梗死后心肌重构的影响和机制,为后续科学研究和临床指导提供参考。方法:实验动物为体重在23.5～27.5g的C57BL/6小鼠、TLR9敲除小鼠(TLR9-KO)以及预处理TLR9激动剂ODN1826和PBS后的C57BL/6小鼠,采用左前降支冠脉结扎术进行急性心肌梗死(MI)的造模,动物随机分为假手术组(Sham)和MI组:a.WT小鼠Sham组;b.TLR9-KO小鼠Sham组;c.WT小鼠MI组;d.TLR9-KO小鼠MI组;e.PBS预处理WT小鼠Sham组;f.ODN1826预处理WT小鼠Sham组;g.PBS预处理WT小鼠MI组;h.ODN1826预处理WT小鼠MI组,记录小鼠术后28天生存情况。造模结束后用超声心动图和血流动力学评价各组小鼠心功能。3%TTC染色判断心脏梗死面积;提取心脏左室蛋白,分别用免疫印迹法检测纤维化、凋亡和血管生成相关蛋白水平;提取心脏左室总RNA采取RT-PCR检测纤维化相关m RNA水平;采用WGA染色法和PSR染色对心脏形态学进行评估;免疫荧光和免疫组化染色检测纤维化、凋亡和血管生成相关蛋白的表达情况,综合评价TLR9在小鼠心梗中的作用。结果:心梗后TLR9的表达水平显著升高,且多集中在梗塞区和边缘区表达,在非梗塞区呈现低表达。TLR9缺失使小鼠心肌梗死的存活率降低,且心肌破裂率升高,心脏扩张加重,射血分数和短轴缩短率降低,与WT小鼠相比差异均有统计学意义(P<0.05);TLR9敲除小鼠急性心梗的α-SMA、p-smad3、胶原1等纤维化相关蛋白表达减少(P<0.05vs.WT-MI);与野生型小鼠相比,TLR9敲除心梗小鼠的TUNEL阳性细胞显著增加(P<0.05);TLR9敲除心梗小鼠心脏中Bax更高而Bcl-2和Bcl-xl更低,同时TLR9敲除心梗小鼠中Bcl-2/Bax和Bcl-xl/Bax的比例较低(P<0.05);免疫荧光结果显示,在WT小鼠梗死心脏组织中,TLR9的表达与HIF-1a的表达存在共定位,且两者的表达水平均升高。免疫组化染色结果显示,HIF-1α,VEGFA和CD31在TLR9KO-MI小鼠心脏的阳性细胞显著比在野生型小鼠少(P?<0.05)。PCNA和CD31双重免疫荧光染色发现,与野生型小鼠相比TLR9敲除心梗小鼠的内皮细胞增殖不足。免疫印迹也证实HIF-1α,VEGFA,CD31,和PCNA的蛋白在TLR9敲除心梗小鼠比野生型小鼠均有明显下调(P<0.05)。TLR9敲除心梗小鼠中CD31阳性和α-SMA阳性细胞数明显低于野生型小鼠(P?<0.05)。TLR9激动剂通过增加纤维修复和血管生成,降低细胞凋亡,对心肌梗死后小鼠产生心脏保护作用。结论:TLR9对于急性心肌梗死的修复至关重要,与心梗后纤维修复、细胞凋亡以及血管生成有关。TLR9激动剂对急性心肌梗死有潜在的治疗前景。