沙棘油化学成分分析与抗氧化活性成分筛选

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目的:表征和比较沙棘果油和沙棘籽油化学成分,筛选其抗氧化活性成分,为沙棘油的质量评价提供参考。方法:收集沙棘果油和籽油样品,采用多仪器平台表征其化学成分,测定其抗氧化活性,并基于化学计量学筛选出抗氧化活性成分和两种沙棘油的差异成分。1. GC-MS定量测定沙棘油中9种脂肪酸:脂肪酸经衍生化生成脂肪酸甲酯,采用DB-17ms毛细管色谱柱进行分离,MRM模式测定,并进行方法学验证;2.HS-GC-MS鉴定沙棘油中挥发性成分:采取顶空进样方式,HP-5ms毛细管色谱柱,全扫描模式测定,运用MS-DIAL软件进行成分鉴定;3.UHPLC-Q-TOF-MS/MS鉴定沙棘油中的甘油酯成分:色谱柱为BEH C18柱,甲醇-异丙醇为流动相,梯度洗脱,在ESI正离子模式对沙棘油中的甘油二酯类和甘油三酯类成分进行分析和鉴定;4. UHPLC-Q-TOF-MS/MS结合分子网络鉴定沙棘油乙醇提取液成分:色谱柱为BEH C18柱,乙腈-水为流动相,梯度洗脱,在ESI负离子模式下测定沙棘油乙醇提取液成分,结合分子网络技术对其进行鉴定;5.沙棘油及其乙醇提取液的抗氧化活性测定:采用DPPH和ABTS两种测定方法,分别以IC50和Trolox当量为指标评估抗氧化活性;6.抗氧化活性成分筛选及沙棘果油和籽油成分综合比较:基于谱-效相关方法,采用典型相关分析、双变量相关分析和正交偏最小二乘回归分析建立沙棘油成分-活性相关模型,筛选潜在抗氧化活性成分。采用正交偏最小二乘-判别分析和t检验综合比较沙棘籽油和沙棘果油的成分组成,并筛选出差异成分。结果:收集沙棘果油和籽油样品各13个;建立了衍生化法测定沙棘油中9种脂肪酸的GC-MS定量方法,方法的线性、精密度、准确度和溶液稳定性均符合要求,测定了各沙棘油样品中的9种脂肪酸含量;HS-GC-MS分析鉴定出77种沙棘油的挥发性成分,主要包括酯类、醇类、醛类和烷烃类等成分;UHPLC-Q-TOF-MS/MS分析共鉴定出85种甘油酯成分,包括9种甘油二酯和76种甘油三酯;从沙棘油的乙醇提取液中共鉴定出79种成分,包括生育酚、黄酮和脂肪酸等类别的化合物;抗氧化活性实验测定结果显示,ABTS法测定的各沙棘油和乙醇提取液的Trolox当量范围分别在3.93-12.51 mmol/g和2.93-11.07 mmol/g之间,DPPH法测定的各沙棘油和乙醇提取液的IC50范围分别在2.15-18.17 mg/m L和3.57-19.58 mg/m L之间;基于成分-抗氧化活性相关分析,最终筛选出沙棘油中11种潜在抗氧化活性成分,分别为α-生育酚、α-生育三烯酚、脱氢-α-生育酚、β-生育三烯酚(或γ-生育三烯酚)、甲基丁香酚、阿魏酸、没食子儿茶素、阿江榄仁酸、Isoneriucoumaric acid、4-羟基苯甲酸和棕榈烯酸;运用化学计量学,发现78种沙棘果油和沙棘籽油的差异成分,包括21种挥发性成分、15种甘油酯成分和42种乙醇提取液成分。结论:本研究系统分析了沙棘油中各类成分,并进行了抗氧化活性测定,筛选出11种抗氧化活性成分。鉴定了沙棘果油和沙棘籽油差异成分78种,其中7种与抗氧化活性相关。该研究为沙棘油质控指标的确定及质量评价体系的建立提供参考。
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