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目的：大肠癌是常见恶性肿瘤之一，发病率呈逐年上升趋势。大肠癌的发生是多基因参与、多步骤、多阶段的复杂过程，存在有各种内外因素交互作用导致的癌基因激活及抑癌基因失活等分子事件。DNA异常甲基化是人类恶性肿瘤发生的一种重要的表遗传学机制，抑癌基因的失活与其启动子高甲基化有密切关系。DNA甲基化是由DNA甲基转移酶(DNA methyltransferases，DNMTs)催化完成的。高等真核生物中发现DNMTs有三种活性形式：DNMT1、DNMT3A和DNMT3B，其中DNMT3B具有从头甲基化(de novomethylation)活性，能使未甲基化的DNA发生甲基化。在恶性肿瘤中可观察到，与DNMT1、DNMT3A相比较，DNMT3B呈明显的过度表达，在肿瘤的发生过程中发挥重要作用。本课题检测了DNMT3B基因启动子区转录起始点39179G-T多态性，以探索其与中国河北汉族人群大肠腺瘤和大肠癌遗传易感性的关系。
方法：采用基于人群的病例-对照研究方法，对473例个体(大肠腺瘤患者146例，大肠腺癌170例，正常对照个体157例)进行研究。所有标本均取自内镜活检的大肠粘膜组织，同时记录吸烟饮酒状态、家族史等信息。组织DNA的提取采用UNIQ-10柱式动物基因组DNA抽提试剂盒提供的方法进行，应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(polymerase chain reaction-restriction fragment lengthpolymorphasm，PCR-RFLP)方法检测DNMT3B的基因型。数据统计分析采用SPSS13.0版软件包(SPSS Company,Chicago，Illinois，USA)进行，P＜0.05认为有统计学意义。对DNMT3B基因型在正常对照组中的分布情况进行Hardy-Weinberg平衡分析(http：//www.kursus.kvl.dk/shares/vetgen/_Popgen/genetik/applets/kitest.htm)。病例组与对照组的基因型分布比较采用行×列表卡方检验。以非条件Logistic回归法计算经性别、年龄、吸烟、饮酒状况和CRC家族史校正的相对风险度的比值比(odds ratio，OR)及其95％可信区间(confidenceinterval，CI)。结果：
1.大肠腺瘤、腺癌患者中CRC家族史阳性者比例(分别为9.6％和11.8％)显著高于健康对照组(3.8％)(x2=4.08，P=0.04；x2=7.04，P=0.008)。大肠腺瘤、腺癌患者组的吸烟者比例(25.3％和30.0％)与正常对照组(24.2％)相比较，无显著性差异(x2=0.05，P=0.82；x21.38，P=0.24)。两组饮酒者比例(10.3％和8.8％)与正常对照组(7.0％)相比较，亦无显著性差异(x2=1.03，P=0.31；x2=0.37，P=0.54)。
2.DNMT3B多态性位点基因型分布在大肠腺瘤、腺癌和正常对照组中均符合Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05)。DNMT3BG39179T多态在大肠腺瘤、腺癌患者组和正常对照组中T/T、G/T+G/G基因型频率分别为79.5％、20.5％，82.4％、17.6％和71.3％、28.7％。在大肠癌患者组中，携带G等位基因的基因型(G/T+G/G)频率(17.6％)明显低于正常对照组(28.7％)(P=0.01)。与T/T基因型相比，携带G等位基因的基因型(G/T+G/G)可降低总体大肠癌发病风险，经性别、年龄、吸烟、饮酒状况和有无CRC家族史多因素校正后的OR值为0.50(95％CI=0.29～0.87)。而大肠腺瘤组与正常对照组比较，携带G等位基因的基因型(G/T+G/G)频率(20.5％)比正常对照组(28.7％)也有减低趋势，但无显著性差异(P＞0.05)，经性别、年龄、吸烟、饮酒状况和有无CRC家族史多因素校正后的OR值为0.63(95％CI=0.37～1.09)。 3 分层分析3.1根据性别进行分层分析发现，与T/T基因型相比，携带G等位基因的基因型(G/T+G/G)可降低男性大肠癌的发病风险，经年龄、吸烟、饮酒状况和家族史校正后的OR值为0.35(95％CI=0.17～0.71)，但未发现与女性大肠癌发病风险相关，亦未发现DNMT3B多态与大肠腺瘤的易患性相关。
3.2根据年龄进行分层分析发现，与T/T基因型相比，携带G等位基因的基因型(G/T G/G)可降低55岁以下个体大肠癌的发病风险，经性别、吸烟、饮酒状况和家族史校正后的OR值为0.3 1(95％CI=0.12～0.84)，但未发现与老年人大肠癌发病风险相关，亦未发现DNMT3B多态与大肠腺瘤的易患性相关。
3.3根据个体吸烟状况进行分层分析发现，与T/T基因型相比，携带G等位基因的基因型(G/T+G/G)可明显降低吸烟个体大肠癌的发病风险，经性别、年龄、饮酒状况和家族史校正后的OR值为0.24(95％CI=0.08～0.75)，未发现DNMT3B多态与大肠腺瘤的发病风险相关。
3.4根据个体饮酒状况进行分层分析发现，与T/T基因型相比，携带G等位基因的基因型(G/T+G/G)可明显降低不饮酒个体大肠癌、大肠腺瘤的发病风险，经性别、年龄、吸烟状况和家族史校正后的OR值分别为0.48(95％CI=0.27～0.84)和0.54(95％CI=0.31～0.96)。 3.5根据CRC家族史进行分层分析发现，与T/T基因型相比，携带G等位基因的基因型(G/T+G/G)可明显降低CRC家族史阴性个体大肠癌的发病风险，经性别、年龄、吸烟、饮酒状况校正后的OR值为0.48(95％CI=0.27～0.85)，未发现DNMT3B多态与大肠腺瘤的发病风险相关。
结论：
1.大肠癌家族史可显著增加大肠腺瘤、腺癌的发病风险。
2.T/T纯合型在河北汉族正常人群中为常见基因型。
3.携带G等位基因的基因型(G/T 与G/G)可降低总体大肠腺癌的发病风险，对大肠腺瘤的发病风险也有降低趋势，但无统计学意义。
4 DNMT3B基因多态性可能与55岁以下男性、吸烟、不饮酒、CRC家族史阴性个体大肠腺癌的发病风险相关，即携带G等位基因可显著降低上述个体大肠腺癌的发病风险。
5 DNMT3B基因多态性可能与不饮酒个体大肠腺瘤的发病风险相关，即携带G等位基因可显著降低不饮酒个体大肠腺瘤的发病风险。