氯苯胍在兔体内最高残留限量标准制订

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氯苯胍(Robenidine),常用其盐酸盐,化学名为1,3-双对氯亚苄基氨基胍酸盐。该药于上世纪70年代初在美国上市并作为饲料添加剂被广泛使用,主要用于预防和治疗鸡的球虫感染,对柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、布氏艾美耳球虫、变位艾美耳球虫等均有效果。氯苯胍在我国主要用于防治鸡、兔以及水产动物的寄生虫感染。本论文研究内容包括以下三个部分:氯苯胍在兔体内的吸收特征与生物利用度;氯苯胍在兔组织中的分布与消除研究;氯苯胍在兔组织中最高残留限量标准的制定建议。16只兔随机分成两组,每组8只。第一组静脉注射给药(2 mg·kg-1),第二组口服给药(100 mg·kg-1),之后采集血液样品。将制备好的血浆待测样品经1%酸化的乙酸乙酯提取、氮气吹干后用1 mL甲醇复溶,0.22μm滤膜过滤,供HPLC进样分析。本实验检测方法的检测限为0.01μg·m L-1,定量限为0.02μg·m L-1,回收率为71.22~109.75%。实验结果表明,兔耳缘静脉注射氯苯胍(2.00 mg·kg-1)后,静注给药的AUC0-t为1.72μg·h·mL-1,CL为1.17 L·h-1·kg-1,Vd为2.87 L·kg-1,Vd(ss)为1.55 L·kg-1,t1/2为1.72 h,表明该药静脉注射后表观分布容积较大,体内分布广泛,消除迅速,在给药剂量为2.00 mg·kg-1的情况下,血浆内的药物6 h即可基本消除;兔口服氯苯胍(100.00 mg·kg-1)后,氯苯胍口服给药吸收非常缓慢,tmax为20 h,并且吸收较差,表现为Cmax较低,仅为0.32μg·mL-1,AUC0-t为6.33μg·h·mL-1,表明药物进入体内的总量很低;CL为16.68 L·h-1·kg-1,t1/2为8.94 h,表明药物在体内分布广泛,并且消除缓慢。经计算,该药物的绝对生物利用度仅为7.36%,表明口服氯苯胍后,通过消化道进入机体内环境的药物量很少,而绝大部分直接排出体外。25只新西兰大白兔饲喂含氯苯胍75 mg·kg-1的饲料,连续饲喂7天,之后在每个时间点随机宰杀5只动物,取肌肉、肝脏、肾脏三种组织,样品经氯仿-甲醇混合液提取,使用HLB净化,HPLC进行测定。氯苯胍在各组织中的最低检测限均为0.01mg·kg-1,最低定量限为0.02 mg·kg-1。在0.05、0.2、2 mg·kg-1三组剂量下,肌肉的回收率为81.91%~109.75%,肾脏的回收率为83.56%~104.46%,肝脏的回收率为84.06%~103.66%。实验结果表明氯苯胍在兔不同组织中代谢速率具有明显差异,各组织的最高总残留浓度分别为肝脏0.16μg·g-1,肾脏0.03μg·g-1,肌肉0.05μg·g-1,药物在肌肉与肾脏组织中消除较快,在肝脏组织中不仅残留浓度最高,且残留消除缓慢,残留靶组织为肝脏。整理国内外毒理学与代谢研究的相关文献报道后,认定氯苯胍的最大无副作用剂量NOAEL为11 mg·kg-1·bw·d-1,安全系数SF为100,计算出每日允许摄入量ADI为0.11 mg·kg-1·bw·d-1。结合本实验获得的氯苯胍在兔体内的生物利用度及组织分布消除数据,对安全性与动物产品质量进行综合分析,认为氯苯胍在兔组织中的最高残留限量无需制订。考虑到氯苯胍对兔产品品质与风味的影响,将休药期拟定为5天。
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