【摘 要】
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本研究采用含高浓度酒精培养基从自然界中分离到63株酵母,经四级筛选,最终获得一株适宜以红薯淀粉为原料,在高温条件下进行生料高浓度发酵的高产酒精酵母菌株,编号为Cor-01。
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本研究采用含高浓度酒精培养基从自然界中分离到63株酵母,经四级筛选,最终获得一株适宜以红薯淀粉为原料,在高温条件下进行生料高浓度发酵的高产酒精酵母菌株,编号为Cor-01。该菌株在料水比为1:2.0,装液量30%(v/v),30℃,100 rpm条件下发酵72 h,发酵醪酒精浓度为12%(v/v)。经鉴定Cor-01菌株属于酿酒酵母属(Saccharomyces)的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。为筛选高耐性高产酒精酵母菌株,以Cor-01菌株为出发菌株,进行60Co-γ射线诱变育种。经四级筛选,最终获得一株高耐性高产酒精酵母菌株Cor-01-M2,遗传稳定性良好。该菌株在料水比为1:2.0,装液量30%(v/v),30℃,100rpm条件下发酵60 h,发酵醪酒精浓度为13%(v/v)。本文系统地研究了Cor-01-M2菌株生料发酵红薯淀粉过程中的各种影响因素,如添加氮源、pH、发酵温度、无机离子(硫、磷、钾、锌、镁、钙、钠、铁、铜、锰、铝)、种子培养时间、接种量、摇床转速、惰性载体等。研究了Cor-01-M2以红薯淀粉为原料的生料发酵条件,并用Plackett-Burman设计和Box-Behenken响应面分析进行了优化,得到Cor-01-M2的最优化条件如下:装液量30%(v/v),料水比为1:2.0,α-淀粉酶添加量为30 U/g,糖化酶添加量为240 U/g,接种量10%(v/v),pH 5.2,摇床转速100 rpm,35℃保温发酵,发酵周期60 h。在所获得的最优发酵条件下,菌株Cor-01-M2的发酵醪酒精浓度达14.5%(v/v)、淀粉出酒率达47.75%,淀粉利用率达84.10%。比初始工艺条件下分别提高了11.54%,比出发菌株分别提高了20.83%。
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