利用cDNA阵列筛选橡胶树抗寒相关基因的研究

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低温是影响橡胶生长和产量的重要环境限制因子。我国植胶区位于北纬18°至24°,是世界植胶区的最北端,低温寒害几乎每年都会发生。近几年生产上遭受的寒潮袭击,导致橡胶大面积减产,给橡胶生产带来巨大损失甚至是毁灭性的危害。因此,橡胶抗寒育种工作在橡胶抗逆育种中是首要的研究内容。植物的抗寒性状是由多基因控制的,只有成簇抗性相关基因的转录激活,才能有效提高作物的抗寒能力。但在植物的抗寒研究中,只有拟南芥的CBF途径研究最清楚并得到广泛的认可,而抗寒基因表达调控机制、编码蛋白质的抗寒机理及整个低温调控网络仍不明了,这样就极大的限制了植物抗寒育种工作。利用植物分子生物学技术来提高植物的抗寒、抗旱能力的研究进展十分迅速。本研究通过cDNA阵列的方法,从巴西橡胶树低温cDNA文库中筛选橡胶冷应答基因调控网络中的一些抗寒相关基因,分析其功能及各个基因之间的相互关系。内容概括如下:1在低温胁迫下,共检测到84条差异表达的基因。在抗性与敏感品种对比中共检测到21条差异表达的基因。低温启动诱导了相当部分的基因上调表达,这些基因大部分是和基本的新陈代谢相关,此外还有细胞过程和信号传导相关的基因。初步获得了橡胶树低温胁迫下基因表达谱。2进一步分析最终筛选出在低温下差异表达的抗寒相关基因:转录因子(锌指蛋白基因、MYB)、蛋白质合成降解相关的泛素、26s蛋白酶体,过氧化物酶体腺苷酸载体基因、能量代谢相关半乳糖-1-磷酸尿苷转移酶。3在本实验中,还检测到一些在低温胁迫下存在表达变化的“假想蛋白”和未定名的蛋白。这些蛋白在低温胁迫过程中有上调表达的也有下调表达的,可能执行某种生物学功能,有的蛋白可能在抗非生物胁迫中具有重要的作用。4利用高通量的基因芯片技术,在基因转录水平分析了低温胁迫下橡胶树基因的表达差异,并初步分析了部分低温下上调表达的基因。为研究橡胶树抗寒胁迫的分子机理打下基础及大量克隆橡胶树抗寒相关基因提供可能,并为最终分子培育橡胶抗寒品种作分子理论依据上及物质上的积累和储备。
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