糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白（Glycosylphosphatidylinositol anchored protein,GPI-Aps）是一类非常重要的膜蛋白,广泛存在于真核生物中,其核心结构域高度保守,一般由GPI部分和蛋白部分组成。其中央结构域含有8个保守的Cys位点,可形成4对二硫键,对维持蛋白结构及功能至关重要。LLG1蛋白及其家族成员是一类典型的GPI-Ap,作为Cr RLK1L家族类受体激酶的分子伴侣,帮助其转运及定位,共同参与调节植物生殖、发育及逆境应答等多种生物学过程。本研究以模式植物拟南芥（Arabidopsis thaliana）为实验材料,利用分子生物学方法克隆到AtLLG1基因并对其定点突变。生物信息学分析表明,AtLLG1因开放阅读框为507 bp,编码168个氨基酸,理论分子质量18.46 k Da。AtLLG1蛋白具有GPI-Ap的典型结构特征,包括N端信号肽、中央区域,以及C端GPI锚定区。3D结构预测表明,AtLLG1蛋白特定Cys位点突变导致的二硫键断裂会影响蛋白原有稳定结构。实时荧光定量分析表明,AtLLG1基因在拟南芥根、茎、叶和花中均差异表达,其在根中表达量最高,在花中表达量最低。在50 mmol/L Na₂CO₃、100 mmol/L Na HCO₃、150 mmol/L Na Cl及4℃低温逆境胁迫下,AtLLG1基因表达量在根和叶中都受诱导上调表达。这暗示AtLLG1基因可能参与多种非生物胁迫应答。通过烟草（Nicotiana tabacum）瞬时表达,对AtLLG1蛋白进行亚细胞定位结果分析,发现AtLLG1各Cys位点突蛋白主要定位在细胞膜上,细胞核或内质网周围也有少量分布;通过构建pCAMBIA1300-AtLLG1植物表达载体,将AtLLG1基因回补至atllg1-2突变体中,同时构建p MDC32-AtLLG1植物表达载体,在野生型拟南芥中过表达AtLLG1基因,观察分析在不同盐胁迫处理下,过表达AtLLG1及AtLLG1回补体植株种子萌发率,结果表明,在盐胁迫条件下,AtLLG1过表达及AtLLG1回补体植株种子萌发率均高于对照组,且幼苗生长速度较快,暗示AtLLG1可能对提高植物盐胁迫抗性有重要作用,此外,通过对不同浓度Nacl处理下过表达AtLLG1植株各株系根系生长表型分析表明,在不同程度的盐胁迫处理下,与野生型拟南芥相比,过表达AtLLG1拟南芥植株根长生长量和植株鲜重均有显著提升,推测AtLLG1基因可能响应植物盐胁迫应答;通过构建p Cold-AtLLG1原核表达载体,对AtLLG1蛋白进行体外诱导及纯化,Western Blot结果显示目的蛋白有三条特异条带,且分子量呈倍数关系,经质谱检测确定各条带均为AtLLG1,说明AtLLG1蛋白Cys位点存在分子间相互作用,通过形成分子间二硫键使目的蛋白以单体或多聚体形式存在,而将关键Cys位点突变后,是否对AtLLG1蛋白结构产生影响,或破坏其Cys位点成键,影响蛋白多聚体形成?这还有待进一步实验验证。综上,我们的研究结果表明,AtLLG1基因可能参与植物盐逆境应答调控过程,同时也积极响应其他非生物胁迫,AtLLG1蛋白关键Cys位点是对蛋白结构功能至关重要,这为深入研究植物盐碱应答分子机制提供了新线索。